| 研究課題/領域番号 |
26670044
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| 研究機関 | 富山大学 |
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研究代表者 |
東田 千尋 富山大学, 和漢医薬学総合研究所, 准教授 (10272931)
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| 研究分担者 |
紺野 勝弘 富山大学, 和漢医薬学総合研究所, 客員教授 (40215471)
数馬 恒平 富山大学, 和漢医薬学総合研究所, 客員助教 (70552446)
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| 研究期間 (年度) |
2014-04-01 – 2017-03-31
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| キーワード | 脊髄損傷 / マイクログリア / 骨格筋細胞 / 皮質脊髄路 / 介在ニューロン / 運動ニューロン |
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| 研究実績の概要 |
本研究では、慢性期脊髄損傷に対する画期的治療薬の開発と、その分子メカニズムの解明を目的とする。ポイントは、機能回復が困難な複数の理由をそれぞれ解決する薬物を合わせたカクテル療法を目指す点にある。本年度の成果は以下の通りである。
a)マイクログリアからの軸索伸展因子放出を活性化する薬物：生後2日後のマウス大脳皮質から初代培養マイクログリアを単離培養し80種類の生薬エキスを処置し、conditioned mediumを取った。それらを別途初代培養した大脳皮質神経細胞に処置した。マイクログリアconditioned medium処置による軸索伸展活性をスクリーニング中である。
b)運動ニューロンと骨格筋組織のシナプス結合を促進する薬物：マウス胎児後肢から骨格筋細胞を初代培養し、125種類の生薬エキスを処置し、conditioned mediumを取った。それらをマウス大脳皮質神経細胞に処置し軸索伸展活性を検討したところ、肉蓯蓉エキスに、骨格筋細胞からの軸索伸展因子放出活性があることを突き止めた。現在、放出される軸索伸展因子の同定を進めているとともに、その因子が脊髄の運動ニューロンに対しても軸索伸展作用を示すかどうかを検討している。
c)CSPG上でも皮質脊髄路や介在ニューロンの軸索伸展を促す薬物：軸索伸展阻害分子であるCSPGをコーティングした培養皿上に、胎児マウス大脳皮質より調製した初代培養神経細胞を播種し、110種類の生薬エキス処置を行った。軸索伸展活性を有する生薬として苦参を見出し、さらのその中の活性化合物としてmatrineを同定した。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
1: 当初の計画以上に進展している
理由
本研究は、3年度の中で、下記の順番で実施する計画を立てている。
1) 運動を制御する、脳 ⇒ 脊髄 ⇒ 筋肉 リレーションすべてのポイントでの軸索伸展を飛躍的に促す新規化合物の発見。2) 受傷後慢性期の軸索伸展を阻んでいる環境要因を変える化合物の発見。3) 運動を制御する、脳⇒脊髄⇒筋肉 リレーションすべてのポイントでの機能向上を実現するカクテル療法の構築。4) 活性化合物の分子機序の解析。
当初の計画では平成26年度には1)の実験を実施することを予定していたが、実際には1) 2)に関する研究が進んだ。
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| 今後の研究の推進方策 |
①平成27年度には、マイクログリアからの軸索伸展因子放出を活性化する生薬の同定を完了させる。またこのマイクログリアがどのようなフェノタイプにものなのか（M1、M2、それ以外）を既知のマイクログリアサブタイプマーカーの発現の有無から解析する。
②肉蓯蓉エキス刺激によって骨格筋細胞から放出される軸索伸展因子の同定を完了させる。その新規myokineともいえる新たな軸索伸展因子に関して、軸索伸展をもたらすメカニズムを解明する。
③CSPG上でも皮質脊髄路や介在ニューロンの軸索伸展を促す生薬として苦参を同定しさらに活性成分としてmatrineを同定したので、matrineの軸索伸展メカニズムを解明する。
④上記①②③で見出した活性生薬をカクテルにして、脊髄損傷慢性期マウスに投与し、運動機能改善効果を検討する。
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