2015 年度研究成果報告書

蛋白質ライゲーションによる網羅的な二重特異性抗体の作製と革新的分子の単離

研究課題

研究課題/領域番号	26670051
研究種目	挑戦的萌芽研究
配分区分	基金
研究分野	創薬化学
研究機関	山形大学
研究代表者	真壁幸樹山形大学, 理工学研究科, 准教授 (20508072)
研究期間 (年度)	2014-04-01 – 2016-03-31
キーワード	蛋白質工学 / 抗体工学 / 蛋白質トランススプライシング / 二重特異性抗体 / 重鎖抗体
研究成果の概要	二重特異性抗体Ia1-cAbGFP4と蛍光蛋白質ラベル化体の作製に成功した。二種類の発現ベクターを同時にBL21(DE3)株に形質転換し、一晩の前培養後に本培養を開始した。IPTGの誘導で発現したIa1-IntNは直ちに既に発現しているIntC-cAbGFP4と反応し、目的産物であるIa1-cABGFP4が作り出された。SDSPAGE上に現れたバンドが目的の物であるかどうかはcAbGFP4のC末端に融合してあるFLAGタグに対する抗体を用いたWestern Blottingにて確認した。二重特異性抗体と蛍光蛋白質ラベル化体の活性をフローサイトメトリーにて確認した。
自由記述の分野	蛋白質工学