研究課題
高齢化に伴い患者数の増加が続いている慢性心不全に対する画期的治療薬の開発は、先進諸国にとって急務の課題である。本研究では、「心不全合併症例への投与が禁忌となっているアルツハイマー病治療薬ドネペジル（以下、DNP）が抗心不全作用を有しているのではないか」、との作業仮説を立て、動物実験により仮説を検証するとともにその作用機序をあきらかにする。従来の研究では、DNPは、中枢性アセチルコリンエステラーゼ阻害作用を持つ薬剤として位置づけられてきた。しかし、ごく最近、申請者によって、DNPが心筋細胞および内皮細胞に直接作用して、HIF-1α、VEGFなどの細胞生存シグナルの誘導をおこなうことがあきらかにされた。このような心筋細胞および内皮細胞に対する直接作用を有するDNPの抗心不全効果を検証することは、挑戦に値する課題である。
2: おおむね順調に進展している
認知症の治療薬として開発され、心不全には禁忌とされているドネペジルに抗心不全効果が期待できるか否かを動物実験であきらかにする。研究期間の初期にin vivo実験系を用いて個体・器官レベルの研究を行い、後期にin vitro実験系を用いて細胞・分子レベルでの研究を行い、ドネペジル（以下、DNP）の抗心不全効果およびその作用機序をあきらかにした。1) DNPの心筋梗塞心不全ラットの生命予後に与える影響の評価:慢性心不全に対する治療法の開発研究の第一歩として実施される動物実験においては、心不全モデルの選定が重要である。本研究では、心筋梗塞心不全モデルを冠動脈結紮Wistarラットで作成し、生命予後を調査した。2) DNPの心不全ラットの心機能に与える影響の評価:DNPが不全心の拡張能・収縮能に与える影響をランゲンドルフ潅流標本を用いて評価した。3) DNPの不全心におけるシグマ受容体を介したACh合成に与える影響の評価:不全心を用いて、DNPのシグマ受容体を介したACh合成系遺伝子および蛋白発現に与える影響をRT-PCR法、蛋白免疫電気泳動法および免疫組織化学法により評価する。すなわち、AChの細胞内合成の律速段階酵素choline acetyltransferase (ChAT)、AChの貯蔵・運搬に関与するvesicular ACh transporter (VAChT)の発現に与えるDNPの影響を評価した。
1) DNPの単離心筋細胞におけるシグマ受容体を介したACh合成に与える影響の評価:DNPがシグマ受容体を介してACh合成系をどのように変化させるかを細胞学的・分子生物学的に検討する。2) DNPの単離心筋細胞における細胞保護作用に関する研究:DNPが「シグマ受容体－細胞内ACh合成系」を介して心筋細胞内のストレス応答に関連する情報伝達系（Akt, HIF-1, bad, bcl-2）の発現にどのような影響を与えるかを検討する。
購入予定のラット摘出心臓灌流装置が廃番となっていたため，次年度使用額を生じた。
ラット摘出灌流装置の代替品を購入するために使用する計画である。
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すべて 雑誌論文 (8件) (うち査読あり 7件、 オープンアクセス 5件) 学会発表 (14件) (うち招待講演 2件)
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