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2015 年度 実施状況報告書

イノシトールリン脂質解析技術の開発

研究課題

研究課題/領域番号 26670132
研究機関秋田大学

研究代表者

佐々木 純子  秋田大学, 医学(系)研究科(研究院), 准教授 (30333371)

研究期間 (年度) 2014-04-01 – 2017-03-31
キーワード細胞内シグナル伝達 / イノシトールリン脂質
研究実績の概要

イノシトールリン脂質(PIPs)は、グリセロールにイノシトール環と2つのアシル基が結合した構造を有する。これまでの研究では、極性基であるイノシトール環のリン酸化状態により7種類に分類し、各々のPIPsはシグナリング分子として機能することが明らかにされている。一方アシル基については、技術的な問題から解析が進んでいない。本研究では、新規のPIPs測定技術の開発と、PIPsアシル基組成を人為的に制御可能な細胞の作出を目指す。
昨年度において開発した、三種のPIP2アイソマー(PI(3,4)P2、PI(4,5)P2、PI(3,5)P2)を識別する方法は、反復分析により、標準品を用いた場合でも溶出時間のずれが生じる、あるいはピーク分離が不十分になるなど、測定が不安定であることが判明した。培養細胞における内在のPIP2アイソマー(アシル基を異にする複数の分子種が存在し、標準品を用いた解析より複雑になる)を見分けるには、測定系の不安定さは致命的である。そこで本年度は再度、PIP2アイソマーを安定して検出できる測定系の開発に取り組んだ。解析に使用する質量分析装置やカラムの種類から見直し、種々の分離条件や検出条件を比較検討した。現在、標準品のPIP2アイソマーを用いた場合ではあるが、安定して三種のPIP2アイソマーを識別できる条件を見出しつつある。今後は、細胞由来の脂質やマウス臓器由来の脂質に応用可能か否かについて解析を進める。

現在までの達成度 (区分)
現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

PIP1アイソマーやPIP2アイソマーを識別する測定系の構築には時間を要すると想定していたが、少なくとも標準品のPIP2アイソマーを、安定的に識別可能な測定系の構築は完了しつつあり、順調に進展している。

今後の研究の推進方策

内在性のPIP2のアイソマーを検出可能か否か解析する。また、PIP1のアイソマーを識別する方法の確立を目指す。さらに、アシル転移酵素安定発現株を用いてPIPsの分子種変動を解析するとともに、細胞応答との関連について解析する。

  • 研究成果

    (4件)

すべて 2015

すべて 雑誌論文 (1件) (うち査読あり 1件、 オープンアクセス 1件) 学会発表 (3件)

  • [雑誌論文] Inositol Polyphosphate-4-Phosphatase Type I Negatively Regulates Phagocytosis via Dephosphorylation of Phagosomal PtdIns(3,4)P2.2015

    • 著者名/発表者名
      Nigorikawa K, Hazeki K, Sasaki J, Omori Y, Miyake M, Morioka S, Guo Y, Sasaki T, Hazeki O. PLoS One.
    • 雑誌名

      PLoS One

      巻: 10 ページ: e0142091

    • DOI

      10.1371/journal.pone.0142091.

    • 査読あり / オープンアクセス
  • [学会発表] ホスホイノシタイドの新しい解析方法2015

    • 著者名/発表者名
      中西広樹、江口賢史、石川将己、鈴木聡、佐々木純子、佐々木雄彦
    • 学会等名
      第38回日本分子生物学会年会・第88回生化学会大会 合同大会
    • 発表場所
      神戸ポートアイランド
    • 年月日
      2015-12-01 – 2015-12-04
  • [学会発表] 心肥大におけるホスホイノシタイド代謝酵素Vps34のタンパク質分解機構の役割2015

    • 著者名/発表者名
      木村洋貴、江口賢史、久場敬司、今井由美子、高須賀俊輔、伊藤玲悦、中村亮太郎、中西広樹、石川将己、佐々木純子、山崎正和、佐々木雄彦
    • 学会等名
      第38回日本分子生物学会年会・第88回生化学会大会 合同大会
    • 発表場所
      神戸ポートアイランド
    • 年月日
      2015-12-01 – 2015-12-04
  • [学会発表] イノシトールリン脂質研究の新しい方法論の提示2015

    • 著者名/発表者名
      中西広樹、小藤智史、江口賢史、中村亮太郎、石川将己、高須賀俊輔、佐々木純子、佐々木雄彦
    • 学会等名
      第14回生命科学研究会
    • 発表場所
      三浦市民ホール
    • 年月日
      2015-06-26 – 2015-06-27

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公開日: 2017-01-06  

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