マイクロキャビティアレイ液体生検技術を用いた肝がん再発超早期診断法の開発

2016 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 26670379
• 研究機関: 福井大学
• 研究代表者: 中本 安成 福井大学, 学術研究院医学系部門, 教授 (40293352)
• 研究期間 (年度): 2014-04-01 – 2017-03-31
• キーワード: 癌 / 細胞・組織 / 蛋白 / ゲノム / 内科

研究実績の概要

マイクロキャビティアレイ液体生検技術を用いて、肝細胞がん（肝がん）循環腫瘍細胞（CTC : circulating tumor cells）を特異的に検出する手法を確立し、治療後の患者を対象とした再発リスク診断法を開発した。CTC検出系の確立はin vitro実験系および臨床研究によって実施した。
（１）肝がんCTC検出系の確立：　肝がん患者の末梢血液中を循環しているCTCを検出する実験系を確立するために、マイクロキャビティアレイの感度・特異性について検討した。（a）血球の通過性、（b）肝がん細胞株HepG2、Huh7、PLC/PRF/5を用いた検出系の確立（in vitro）において、肝がん細胞の特異的な検出率（回収率）はそれぞれ66％、76％、99％であった。さらに、肝がん細胞の定量性に関しては、腫瘍関連マーカーAFP、GPC3、EpCAM、ASGR遺伝子の発現量（mRNA）をreal-time RT-PCR技術にて確認した。
（２）肝がん患者からのCTC検出；臨床研究：　（１）で確立した検出系を用いて、肝癌患者19例、肝硬変患者(非担癌患者)11例、健常人7例の全血3mLより検出した。肝癌患者において８９％（17/19）でCTCを検出した。進行度別のCTC数では血清AFP値（<4 vs. 4< ng/mL）：3.9 vs. 97.3個（P < 0.05）、腫瘍個数（1 vs. 2< 個）：13.0 vs. 79.3個、最大腫瘍径（<30 vs 30< mm）：61.9 vs. 59.8個であり、進行と共にCTC数は増加傾向を示すことが分かった。

研究成果

• [雑誌論文] Identification of novel variants in HLA class II region related to HLA DPB1 expression and disease progression in patients with chronic hepatitis C. (2017)
  • 著者名/発表者名: Hiramatsu K, Matsuda H, Nemoto T, Nosaka T, Saito Y, Naito T, Takahashi K,Ofuji K, Ohtani M, Suto H, Yasuda T, Hida Y, Kimura H, Soya Y, Nakamoto Y.
  • 雑誌名: J Med Virol. 巻: in press ページ: -
  • DOI: doi: 10.1002/jmv.24814.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Perioperative plasma glypican-3 level may enable prediction of the risk of recurrence after surgery in patients with stage I hepatocellular carcinoma. (2017)
  • 著者名/発表者名: Ofuji K, Saito K, Suzuki S, Shimomura M, Shirakawa H, Nobuoka D, Sawada Y, Yoshimura M, Tsuchiya N, Takahashi M, Yoshikawa T, Tada Y, Konishi M, Takahashi S, Gotohda N, Nakamoto Y, Nakatsura T.
  • 雑誌名: Oncotarget. 巻: in press ページ: -
  • DOI: doi: 10.18632/oncotarget.14271.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Promising new strategies for hepatocellular carcinoma. (2016)
  • 著者名/発表者名: Nakamoto Y.
  • 雑誌名: Hepatol. Res. 巻: 47 ページ: 251-265
  • DOI: doi: 10.1111/hepr.12795.
  • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Long-Term Endoscopic Follow-Up of Patients with Chronic Radiation Proctopathy after Brachytherapy for Prostate Cancer. (2016)
  • 著者名/発表者名: Ohtani M, Suto H, Nosaka T, Saito Y, Ozaki Y, Hayama R, Naito T, Takahashi K, Ofuji K, Matsuda H, Hiramatsu K, Nemoto T, Shioura H, Kimura H, Aoki Y, Yokoyama O, Nakamoto Y.
  • 雑誌名: Diagn. Ther. Endosc. 巻: 2016 ページ: 1414090
  • DOI: doi: 10.1155/2016/1414090.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Effect of green tea catechins on gastric mucosal dysplasia in insulin-gastrin mice. (2016)
  • 著者名/発表者名: Ohno T, Ohtani M, Suto H, Ohta M, Imamura Y, Matsuda H, Hiramatsu K, Nemoto T, Nakamoto Y.
  • 雑誌名: Oncol. Rep. 巻: 35 ページ: 3241-3247
  • DOI: doi: 10.3892/or.2016.4717.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [学会発表] Development of a Novel Circulating Tumor Cells Isolation System in Patients with Hepatocellular Carcinoma Using a Microcavity Array. (2016)
  • 著者名/発表者名: Takahashi K, Ofuji K, Nosaka T, Ozaki Y, Matsuda H, Ohtani M, Hiramatsu K, Nemoto T, Matsunaga Tatsuya Nakamoto Y.
  • 学会等名: The 67th Annual Meeting of the American Association for the Study of Liver Diseases (AASLD 2016)
  • 発表場所: Boston, Massachusetts
  • 年月日: 2016-11-13
  • 国際学会
• [学会発表] Perioperative plasma glypican-3 levels predict the risk of post-operative recurrence. (2016)
  • 著者名/発表者名: Ofuji K, Saito K, Nosaka T, Takahashi K, Naito T, Matsuda H, Ohtani M, Hiramatsu K, Nemoto T, Nakamoto Y.
  • 学会等名: The 67th Annual Meeting of the American Association for the Study of Liver Diseases (AASLD 2016)
  • 発表場所: Boston, Massachusetts
  • 年月日: 2016-11-11
  • 国際学会
• [学会発表] Comparison of patient characteristics and survival between elderly and younger patients with hepatocellular carcinoma related to hepatitis C virus infection. (2016)
  • 著者名/発表者名: Nemoto T, Matsuda H, Ohtani M, Nakamoto Y.
  • 学会等名: 23rd International Symposium on Hepatitis C Virus and Related Viruses Kyoto
  • 発表場所: Kyoto International Conference Center(Kyoto)
  • 年月日: 2016-10-13
  • 国際学会
• [学会発表] Analysis of glypican-3 as a predictive marker for postoperative recurrence of HCV related hepatocellular carcinoma. (2016)
  • 著者名/発表者名: Ofuji K, Saito K, Matsuda H, Ohtani M, Hiramatsu K, Nemoto T, Nakamoto Y, Nakatsura T.
  • 学会等名: 23rd International Symposium on Hepatitis C Virus and Related Viruses Kyoto
  • 発表場所: Kyoto International Conference Center(Kyoto)
  • 年月日: 2016-10-13
  • 国際学会
• [学会発表] High-dose cyclophosphamide Eradicates Hepatoma Cells by rapid recruitment of CD4+ cytolytic T cells into tumor sites via the CCL3/CCR5 axis. (2016)
  • 著者名/発表者名: Naito T, Baba T, Takeda K, Sasaki S, Matsuda H, Ohtani M, Hiramatsu K, Nemoto T, Mukaida N, Nakamoto Y.
  • 学会等名: The 12th JSH Single Topic Conference in Kanazawa
  • 発表場所: Hotel Nikko Kanazawa(Kanazawa)
  • 年月日: 2016-09-23
  • 国際学会
• [学会発表] Influence of antithrombotic drugs on gastric ulcer healing after endoscopic submucosal dissection. (2016)
  • 著者名/発表者名: Ohtani M, Suto H, Nosaka T, Saito Y, Ozaki Y, Hayama R, Naito T, Takahashi K, Ofuji K, Matsuda H, Hiramatsu K, Nemoto T, Nakamoto Y.
  • 学会等名: Digestive Disease Week 2016
  • 発表場所: San Diego U.S.A.
  • 年月日: 2016-05-21 – 2016-05-24
  • 国際学会
• [学会発表] Endoscopic long-term follow-up of chronic radiation proctopathy after brachytherapy for prostate cancer. (2016)
  • 著者名/発表者名: Takahashi K, Suto H, Nosaka T, Saito Y, Ozaki Y, Hayama R, Naito T, Ohtani M, Ofuji K, Matsuda H, Hiramatsu K, Nemoto T, Nakamoto Y.
  • 学会等名: Digestive Disease Week 2016
  • 発表場所: San Diego U.S.A.
  • 年月日: 2016-05-21 – 2016-05-24
  • 国際学会