尿中輸送体測定を用いた降圧利尿薬オーダーメイド医療の開発

2015 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 26670428
• 研究機関: 東京医科歯科大学
• 研究代表者: 蘇原 映誠 東京医科歯科大学, 医歯(薬)学総合研究科, 准教授 (90510355)
• 研究期間 (年度): 2014-04-01 – 2016-03-31
• キーワード: 塩分感受性 / WNKキナーゼ

研究実績の概要

偽性低アルドステロン症２型原因遺伝子として、WNK1及びWNK4が同定されており、新たにKLHL3とCullin3がPHAIIの原因遺伝子として同定されたことから、ヒトPHAII患者と同じ変異を持つKLHL3R528H/+ノックインマウスを作成解析し、WNKがKLHL3と結合して蛋白分解系に取り込まれること、PHAII変異によってWNK蛋白の分解が減ることによって、WNKシグナルが亢進するため発症することを解き明かした(Hum Mol Genet. 2014)。また、質量分析を用いてKLHL3のリン酸化サイトを同定し、PKAとAktによるKLHL3リン酸化がWNK4との結合を制御することを明らかにした。これはインスリンやバゾプレッシンによるWNKシグナル制御の生理的メカニズムの１つであると考えられた(BBRC 2015)。また、WNKはKLHL2/3-CUL3複合体によるユビキチン修飾後、プロテアソームによる分解だけでなく、p62を介した選択的オートファジーによる制御も受けていることを報告した（J Am Soc Nephrol. 2015, Biochem J. 2015）。また、新しいWNKの下流にあるSPAK阻害薬のスクリーニングを行い、報告した(J Am Soc Nephrol. 2015)。尿中輸送体測定はNCCとAQP2は測定可能(AJP. 2013)となったが、NKCC2については測定系の作成を試み、継続中である。

研究成果

• [雑誌論文] Comprehensive genetic testing approach for major inherited kidney diseases, using next-generation sequencing with a custom panel. (2016)
  • 著者名/発表者名: Mori T, Hosomichi K, Chiga M, Mandai S, Nakaoka H, Sohara E, Okado T, Rai T, Sasaki S, Inoue I, Uchida S.
  • 雑誌名: Clin Exp Nephrol. 巻: 印刷中 ページ: 印刷中
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Kelch-like 3/Cullin 3 ubiquitin ligase complex and WNK signaling in salt-sensitive hypertension and electrolyte disorder. (2016)
  • 著者名/発表者名: Sohara E, Uchida S.
  • 雑誌名: Nephrol Dial Transplant. 巻: 印刷中 ページ: 印刷中
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Generation and analysis of knock-in mice carrying pseudohypoaldosteronism type II-causing mutations in the cullin 3 gene. (2015)
  • 著者名/発表者名: Araki Y, Rai T, Sohara E, Mori T, Inoue Y, Isobe K, Kikuchi E, Ohta A, Sasaki S, Uchida S.
  • 雑誌名: Biol Open. 巻: 4 ページ: 1509-1517
  • DOI: 10.1242/bio.013276.
  • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Impaired degradation of WNK by Akt and PKA phosphorylation of KLHL3. (2015)
  • 著者名/発表者名: Yoshizaki Y, Mori Y, Tsuzaki Y, Mori T, Nomura N, Wakabayashi M, Takahashi D, Zeniya M, Kikuchi E, Araki Y, Ando F, Isobe K, Nishida H, Ohta A, Susa K, Inoue Y, Chiga M, Rai T, Sasaki S, Uchida S, Sohara E.
  • 雑誌名: Biochem Biophys Res Commun. 巻: 467 ページ: 229-234
  • DOI: 10.1016/j.bbrc.2015.09.184
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Generation of Hypertension-Associated STK39 Polymorphism Knockin Cell Lines With the Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats/Cas9 System. (2015)
  • 著者名/発表者名: Mandai S, Mori T, Sohara E, Rai T, Uchida S.
  • 雑誌名: Hypertension. 巻: 66 ページ: 1199-1206
  • DOI: 10.1161/HYPERTENSIONAHA.115.05872.
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Involvement of selective autophagy mediated by p62/SQSTM1 in KLHL3-dependent WNK4 degradation. (2015)
  • 著者名/発表者名: Mori Y, Mori T, Wakabayashi M, Yoshizaki Y, Zeniya M, Sohara E, Rai T, Uchida S.
  • 雑誌名: Biochem J. 巻: 472 ページ: 33-41
  • DOI: 10.1042/BJ20150500.
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Kelch-Like Protein 2 Mediates Angiotensin II-With No Lysine 3 Signaling in the Regulation of Vascular Tonus. (2015)
  • 著者名/発表者名: Zeniya M, Morimoto N, Takahashi D, Mori Y, Mori T, Ando F, Araki Y, Yoshizaki Y, Inoue Y, Isobe K, Nomura N, Oi K, Nishida H, Sasaki S, Sohara E, Rai T, Uchida S.
  • 雑誌名: J Am Soc Nephrol. 巻: 26 ページ: 2129-2138
  • DOI: 10.1681/ASN.2014070639.
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Discovery of Novel SPAK Inhibitors That Block WNK Kinase Signaling to Cation Chloride Transporters. (2015)
  • 著者名/発表者名: Kikuchi E, Mori T, Zeniya M, Isobe K, Ishigami-Yuasa M, Fujii S, Kagechika H, Ishihara T, Mizushima T, Sasaki S, Sohara E, Rai T, Uchida S.
  • 雑誌名: J Am Soc Nephrol. 巻: 26 ページ: 1525-1536
  • DOI: 10.1681/ASN.2014060560.
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [学会発表] Generation and analysis of knock-in mice carrying pseudohypoaldosteronism type II-causing mutations in the cullin 3 gene. (2015)
  • 著者名/発表者名: Araki Y, Rai T, Sohara E, Mori T, Inoue Y, Kikuchi E, Uchida S.
  • 学会等名: The 48th Annual Meeting of American Society of Nephrology
  • 発表場所: San Diego(USA)
  • 年月日: 2015-11-05 – 2015-11-08
  • 国際学会
• [学会発表] Combination of Low Body Mass Index and Serum Albumin Level Leads to Chronic Kidney Disease Progression: The Chronic Kidney Disease–Research of Outcomes in Treatment and Epidemiology Study. (2015)
  • 著者名/発表者名: Kikuchi H, Kanda E, Iimori S, Naito S, Sasaki S, Sohara E, Okado T, Rai T, Uchida S.
  • 学会等名: The 48th Annual Meeting of American Society of Nephrology
  • 発表場所: San Diego(USA)
  • 年月日: 2015-11-05 – 2015-11-08
  • 国際学会
• [学会発表] Generation of Hypertension-Associated STK39 Polymorphism Knock-in Cell Lines with the CRISPR/Cas9 System. (2015)
  • 著者名/発表者名: Mandai S, Mori T, Sohara E, Rai T, Uchida S.
  • 学会等名: The 48th Annual Meeting of American Society of Nephrology
  • 発表場所: San Diego(USA)
  • 年月日: 2015-11-05 – 2015-11-08
  • 国際学会
• [学会発表] Potassium-induced dephosphorylation of renal sodium-chloride cotransporter is NOT dependent on the anions. (2015)
  • 著者名/発表者名: Nomura N, Shoda W, Sohara E, Rai T, Uchida S.
  • 学会等名: The 48th Annual Meeting of American Society of Nephrology
  • 発表場所: San Diego(USA)
  • 年月日: 2015-11-05 – 2015-11-08
  • 国際学会
• [学会発表] The Major Contribution of WNK4 to the Pathogenesis of Pseudohypoaldosteronism Type II (PHAII) Caused by the KLHL3 Mutation R528H. (2015)
  • 著者名/発表者名: Susa K, Sohara E, Takahashi D, Rai T, Uchida S.
  • 学会等名: The 48th Annual Meeting of American Society of Nephrology
  • 発表場所: San Diego(USA)
  • 年月日: 2015-11-05 – 2015-11-08
  • 国際学会
• [学会発表] Angiotensin II による 血管平滑筋収縮における, KLHL2-WNK3-SPAK-NKCC1 カスケードの関与. (2015)
  • 著者名/発表者名: 銭谷 慕子, 高橋 大栄, 森 雄太郎, 森 崇寧, 蘇原 映誠, 頼 建光, 内田 信一.
  • 学会等名: 第 6 回分子腎臓フォーラ ム.
  • 発表場所: グランフロント大阪(大阪府,大阪市)
  • 年月日: 2015-09-05 – 2015-09-05
• [学会発表] 遺伝性腎疾患が明らかにする腎生理と新たな創薬への道. (2015)
  • 著者名/発表者名: 蘇原 映誠, 森 崇寧, 頼 建光, 内田 信一.
  • 学会等名: 第 58 回日本腎臓学会学術総会
  • 発表場所: 名古屋国際会議場(愛知県,名古屋)
  • 年月日: 2015-09-05 – 2015-09-05
  • 招待講演
• [学会発表] 次世代シークエン サーを用いた遺伝性腎疾患網羅的診断キットの開発. (2015)
  • 著者名/発表者名: 森 崇寧, 細道 一善, 蘇原 映誠, 頼 建光, 佐々木 成, 井ノ上 逸朗, 内田 信一.
  • 学会等名: 第58回日本腎臓学会学術総会
  • 発表場所: 名古屋国際会議場(愛知県,名古屋)
  • 年月日: 2015-09-05 – 2015-09-05
• [学会発表] p62/SQSTM1 が関わる WNK4 の選択的オートファジーと偽性低アルドステロン症 II 型との関わり (2015)
  • 著者名/発表者名: 森 雄太郎, 森 崇寧, 若林 麻衣, 銭谷 慕子, 蘇原 映誠, 頼 建光, 佐々木 成, 内田 信一
  • 学会等名: 第 58 回日本腎臓学会学術総会.
  • 発表場所: 名古屋国際会議場(愛知県,名古屋)
  • 年月日: 2015-09-05 – 2015-09-05
• [学会発表] PKAとAktによるKLHL3リン酸化がWNK4との 結合を制御する. (2015)
  • 著者名/発表者名: 吉崎幸, 蘇原映誠, 森崇寧, 若林麻衣, 高橋大栄, 銭谷慕子, 菊池絵梨子, 森雄太郎, 荒木 雄也, 安藤 史顕, 頼 建光, 佐々木 成, 内田 信一
  • 学会等名: 第 58 回日本腎臓学会学術総会
  • 発表場所: 名古屋国際会議場(愛知県,名古屋)
  • 年月日: 2015-09-05 – 2015-09-05
• [学会発表] WNK キナーゼ分解を介した新たな塩分感受性制御機構. (2015)
  • 著者名/発表者名: 蘇原映誠
  • 学会等名: 第 40 回関東腎研究会
  • 発表場所: クラブ関東(東京都、東京)
  • 年月日: 2015-07-25 – 2015-07-25
  • 招待講演
• [学会発表] Cullin3 変異を持つ偽性低アルドステロン症 II 型(PHAII)モデルマウスの作製. (2015)
  • 著者名/発表者名: 荒木雄也, 井上佑一, 森崇寧, 磯部清志, 菊池絵梨子, 佐々木成, 蘇原映誠, 頼建光, 内田 信一
  • 学会等名: 第 58 回日本腎臓学会学術総会
  • 発表場所: 名古屋国際会議場(愛知県,名古屋)
  • 年月日: 2015-06-05 – 2015-06-07
• [備考] 東京医科歯科大学 腎臓内科学 ホームページ
  • URL: http://www.tmd.ac.jp/grad/kid/index.html