患者および保護者に研究についてのインフォームドコンセントを行った上で熱性けいれん症例の解析を行っている。研究期間に患者100例の末梢血を採取し解析を行った。 1)熱性けいれん患者における末梢血タンパク成分の解析:患者末梢血より遠心分離により血漿成分を分離している。血漿タンパクの二次元電気泳動し、タンパク成分をナイロンメンブレンに転写したのち、タンパクを染色し特異低に増加するタンパクスポットの検討を行った。患者の血漿タンパク泳動パターンより、発症時に特異的に変化するタンパクスポットについてMAS解析を行った。この結果をもとに、熱性けいれんに特異的に増加する候補タンパクの同定を行っている。 2)熱性けいれん患者におけるmiRNA発現パターンの解析:採取した末梢血よりnirvana PARIS Kitを用いてtotal RNAを抽出し、Megaplex human poolによりmiRNAの逆転写を行った上で、human pool A primerを用いてreal time PCRを行った。その後、miRNA array解析では、熱性けいれん患者でで特異的に変化するmiRNA候補を検索している。現在のところ、変化するmiRNAの傾向は把握できているが、まだ、病因にたどり着くmiRNAの同定には至っていない。 熱性けいれん患者の末梢血における、タンパク成分の変化とmiRNAの発現パターンの変化の両方向からの解析により、熱性けいれん発症時の引き金(病因)と結びつく成分の同定を試みている。
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