小児急性白血病の発症前診断法の開発

2015 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 26670503
• 研究機関: 愛媛大学
• 研究代表者: 石井 榮一 愛媛大学, 医学(系)研究科(研究院), 教授 (20176126)
• 研究分担者: 江口 真理子 愛媛大学, 医学(系)研究科(研究院), 准教授 (40420781) ; 江口 峰斉 愛媛大学, 医学部附属病院, 講師 (50420782)
• 研究期間 (年度): 2014-04-01 – 2016-03-31
• キーワード: 小児血液学 / 白血病 / 融合遺伝子

研究実績の概要

小児急性リンパ性白血病医におけるMLL-AF4およびTEL-AML1融合遺伝子のDNAを用いた迅速な検出・同定の方法は前年度に確立できており、白血病症例の初診時検体の場合にはDNA を用いた1回のPCRでこれらの融合遺伝子のゲノム上の融合配列を同定することが可能である。
微小病変の検出を目的とした実験では、これらの融合遺伝子を有する白血病症例の治療後の検体や白血病細胞株を非白血病細胞と混合した培養液などを用いた。白血病細胞が概ね1万分の1以下のレベルでは、融合遺伝子のPCR産物のサイズによって検出の可否が影響され、PCR産物のサイズがある程度大きな場合には検出率は低下した。
現在MLL-AF4融合遺伝子で44個のプライマー、TEL-AML1融合遺伝子で67個のプライマーを用いてそれぞれの転座集中領域のほぼ全域をカバーしているが、PCR産物のサイズを小さくするために、プライマーの数をさらに増やして、プライマー同士の間隔をより短くすることで結果を改善できると思われ、今後検討を続けていく。
検出方法をより簡便にするために、ガスリー血などの濾紙血を用いて、DNA抽出を行わずにゲノム上の融合遺伝子検出を試みたが、同様にPCR産物のサイズが大きな場合には増幅産物を得ることは困難であった。この点に関しても前述のごとく改善試み検討を続けていく。
またこれらの融合遺伝子以外にも急性骨髄性白血病で認められるAML1-ETOやPML-RARA、小児軟部腫瘍で認められるEWS-FLI1などの融合遺伝子についても同様の方法で迅速に検出・同定する方法をほぼ確立できた。

研究成果

• [雑誌論文] HMGA2 as a potential molecular target in KMT2A-AFF1-positive infant acute lymphoblastic leukaemia. (2015)
  • 著者名/発表者名: Wu Z, Eguchi-Ishimae M, Yagi C, Iwabuki H, Gao W, Tauchi H, Inukai T, Sugita K, Ishii E, Eguchi M
  • 雑誌名: Br J Haematol 巻: 171 ページ: 818-829
  • DOI: 10.1111/bjh.13763
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Lineage-dependent skewing of loss of heterozygosity (LOH) of KRAS gene in a case of juvenile myelomonocytic leukemia. (2015)
  • 著者名/発表者名: Tokuda K, Eguchi-Ishimae M, Iwabuki H, Kawakami S, Tauchi H, Ishii E, Eguchi M
  • 雑誌名: Eur J Haematol 巻: 94 ページ: 177-181
  • DOI: 10.1111/ejh.12355
  • 査読あり
• [雑誌論文] Identification of CD34+ and CD34- leukemia-initiating cells in MLL-rearranged human acute lymphoblastic leukemia. (2015)
  • 著者名/発表者名: Aoki Y, Watanabe T, Saito Y, Kuroki Y, Hijikata A, Takagi M, Tomizawa D, Eguchi M, Eguchi-Ishimae M, Kaneko A, Ono R, Sato K, Suzuki N, Fujiki S, Koh K, Ishii E, Shultz LD, Ohara O, Mizutani S, Ishikawa F
  • 雑誌名: Blood 巻: 125 ページ: 967-980
  • DOI: 10.1182/blood-2014-03-563304
  • 査読あり
• [雑誌論文] Early use of allogeneic hematopoietic stem cell transplantation for infants with MLL gene-rearrangement-positive acute lymphoblastic leukemia. (2015)
  • 著者名/発表者名: Koh K, Tomizawa D, Moriya Saito A, Watanabe T, Miyamura T, Hirayama M, Takahashi Y, Ogawa A, Kato K, Sugita K, Sato T, Deguchi T, Hayashi Y, Takita J, Takeshita Y, Tsurusawa M, Horibe K, Mizutani S, Ishii E
  • 雑誌名: Leukemia 巻: 29 ページ: 290-296
  • DOI: 10.1038/leu.2014.172
  • 査読あり
• [雑誌論文] 小児白血病研究の現状と展望―白血病幹細胞を中心として― (2015)
  • 著者名/発表者名: 江口真理子、石前峰斉、石井榮一
  • 雑誌名: 臨床血液 巻: 56 ページ: 1871-1881
  • DOI: 10.11406/rinketsu.56.1871
  • 査読あり
• [学会発表] 日本におけるHLH-2004プロトコールによる血球貪食性リンパ組織球症の治療成績 (2015)
  • 著者名/発表者名: 石井榮一、渡邉智之、中沢洋三、今村俊彦、金兼弘和、柳沢 龍、細谷要介、森谷邦彦、鬼頭敏幸、中川慎一郎、土居岳彦、大賀正一、塩田曜子、工藤寿子、森本 哲
  • 学会等名: 第57回日本小児血液・がん学会
  • 発表場所: 山梨県甲府市
  • 年月日: 2015-11-27 – 2015-11-29
• [学会発表] 非寛解期に臍帯血移植を行った先天性急性単球生白血病の一例 (2015)
  • 著者名/発表者名: 井上真依子、森谷京子、米澤早知子、江口真理子、石前峰斉、田内久道、石井榮一
  • 学会等名: 第57回日本小児血液・がん学会
  • 発表場所: 山梨県甲府市
  • 年月日: 2015-11-27 – 2015-11-29
• [学会発表] びまん性橋グリオーマ(DIPG)の治療経過中にサイトメガロウイルス感染から血球貪食症候群を発症した1剖検例 (2015)
  • 著者名/発表者名: 久保田真理、田内久道、井上真依子、新田美里、森谷京子、米澤早知子、石前峰斉、江口真理子、石井榮一、倉田美恵、増本純也
  • 学会等名: 第57回日本小児血液・がん学会
  • 発表場所: 山梨県甲府市
  • 年月日: 2015-11-27 – 2015-11-29
• [学会発表] 単一施設における小児がん患者の死亡例に関する検討 (2015)
  • 著者名/発表者名: 米澤早知子、田内久道、新田美里、森谷京子、石前峰斉、江口真理子、石井榮一
  • 学会等名: 第57回日本小児血液・がん学会
  • 発表場所: 山梨県甲府市
  • 年月日: 2015-11-27 – 2015-11-29
• [学会発表] Inafnt acute bilineal leukemia with MLL-AF4 fusion gene (2015)
  • 著者名/発表者名: 石前峰斉、江口真理子、武洲英、森谷京子、米澤早知子、井上真依子、久保田真理、新田美里、手塚優子、田内久道、石井榮一
  • 学会等名: 第77回日本血液学会
  • 発表場所: 石川県金沢市
  • 年月日: 2015-10-16 – 2015-10-18
• [学会発表] 当科で経験した小児がん経験者の二次がん4症例の検討 (2015)
  • 著者名/発表者名: 新田美里、田内久道、米澤早知子、森谷京子、久保田真理、石前峰斉、江口真理子、石井榮一
  • 学会等名: 第118回日本小児科学会
  • 発表場所: 大阪府大阪市
  • 年月日: 2015-04-17 – 2015-04-19