肺癌幹細胞因子の同定とその特性を標的とした分子標的治療薬の開発

2015 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 26670625
• 研究機関: 名古屋大学
• 研究代表者: 鈴木 元 名古屋大学, 医学(系)研究科(研究院), 講師 (80236017)
• 研究分担者: 福井 高幸 名古屋大学, 医学部附属病院, 病院講師 (70463198) ; 若原 恵子 名古屋大学, 医学部附属病院, 病院講師 (00631433) ; 加藤 省一 名古屋大学, 医学(系)研究科(研究院), 講師 (30584669) ; 西田 篤司 千葉大学, 薬学研究科(研究院), 教授 (80130029)
• 研究期間 (年度): 2014-04-01 – 2016-03-31
• キーワード: 肺がん / がん幹細胞

研究実績の概要

１．候補タンパク質の肺癌幹細胞特性に対する機能を明らかにする。
がん幹細胞因子の抽出と腫瘍形成に対する影響：癌幹細胞の一つの特徴は少数の細胞で腫瘍形成を行うことである。候補遺伝子が癌幹細胞因子か否か決定するため、臨床検体由来肺癌幹細胞を用いて以下の実験を行った。
臨床検体を一旦ゼノグラフトとしてマウスに移植、腫瘍サイズを増大した。ゼノグラフト回収後、コラゲナーゼ処理、癌幹細胞培養条件下で培養した。CD166ソーティングによって癌幹細胞を濃縮、1000個の細胞をマウスに移植。腫瘍形成の有無を観察した。平成27年度中に40検体を用いて実験を実施したが培養細胞系に持っていける腫瘍はなかった。一方、平成27年度中に樹立した細胞株においては、皮下腫瘍にくわえ、肺転移モデルとして用いることが可能であった。さらに、ゼノグラフトよりの腫瘍の回収条件、細胞培養条件あるいは、ショートヘアピンコンストラクトなどに関して各種条件検討を行った結果、この細胞を用いた特定遺伝子のノックダウンが可能となった。ノックダウン後の細胞についてはさらにCD166陽性細胞をFACSにて回収し一定数をマウス皮下及び尾静脈より接種した。これらマウスにおける腫瘍形成能の有無については現在も引き続き観察を行っている。
2.　 肺癌幹細胞に対する分子標的治療薬開発を行う。
644化合物種からなる低分子化合物ライブラリーを用いてスクリーニングを行い、標的候補タンパク質の酵素活性に対する阻害剤をスクリーニングした。一化合物及びその類縁体で阻害活性を有する化合物がえられた。引き続きそれら化合物を元に至適化を行っている。

研究成果

• [雑誌論文] Effect of pH on the misincorporation rate of DNA polymerase eta (2016)
  • 著者名/発表者名: Nishimoto N, Suzuki M, Izuta S
  • 雑誌名: Biol Pharm Bull 巻: in press ページ: in press
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Resveratrol-induced transcriptional up-regulation of ASMase (SMPD1) of human leukemia and cancer cells (2016)
  • 著者名/発表者名: Mizutani N, Omori Y, Kawamoto Y, Sobue S, Ichihara M, Suzuki M, Kyogashima M, Nakamura M, Tamiya-Koizumi K, Nozawa Y, Murate T
  • 雑誌名: Biochem Biophys Res Commun 巻: 470 ページ: 851-856
  • DOI: 10.1016/j.bbrc.2016.01.134
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] ROR1 sustains caveolae and survival signalling as a scaffold of cavin-1 and caveolin-1 (2016)
  • 著者名/発表者名: Yamaguchi T, Lu C, Ida L, Yanagisawa K, Usukura J, Cheng J, Hotta N, Shimada Y, Isomura H, Suzuki M, Fujimoto T, Takahashi T
  • 雑誌名: Nat Commun 巻: 7 ページ: 10060
  • DOI: doi: 10.1038/ncomms10060
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Targeting ceramide synthase 6-dependent metastasis-prone phenotype in lung cancer cells (2016)
  • 著者名/発表者名: Suzuki M, Cao K, Kato S, Komizu Y, Mizutani N, Tanaka K, Arima C, Tai MC, Yanagisawa K, Togawa N, Shiraishi T, Usami N, Taniguchi T, Fukui T, Yokoi K, Wakahara K, Hasegawa Y, Mizutani Y, Igarashi Y, Inokuchi J他
  • 雑誌名: J Clin Invest 巻: 126 ページ: 254-265
  • DOI: 10.1172/JCI79775
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Receptor tyrosine kinase-like orphan receptor 1, a target of NKX2-1/TTF-1 lineage-survival oncogene, inhibits apoptosis signal-regulating kinase 1-mediated pro-apoptotic signaling in lung adenocarcinoma (2016)
  • 著者名/発表者名: Ida L, Yamaguchi T, Yanagisawa K, Kajino T, Shimada Y, Suzuki M, Takahashi T
  • 雑誌名: Cancer Sci 巻: 107 ページ: 155-161
  • DOI: 10.1111/cas.12858
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Increased acid ceramidase expression depends on upregulation of androgen-dependent deubiquitinases, USP2, in a human prostate cancer cell line, LNCaP (2016)
  • 著者名/発表者名: Mizutani N, Inoue M, Omori Y, Ito H, Tamiya-Koizumi K, Takagi A, Kojima T, Nakamura M, Iwaki S, Nakatochi M, Suzuki M, Nozawa Y, Murate T
  • 雑誌名: J Biochem 巻: 158 ページ: 309-319
  • DOI: 10.1093/jb/mvv039
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] miR-342-3p regulates MYC transcriptional activity via direct repression of E2F1 in human lung cancer (2016)
  • 著者名/発表者名: Tai MC, Kajino T, Nakatochi M, Arima C, Shimada Y, Suzuki M, Miyoshi H, Yatabe Y, Yanagisawa K, Takahashi T
  • 雑誌名: Carcinogenesis 巻: 36 ページ: 1464-1473
  • DOI: 10.1093/carcin/bgv152
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Increased SPHK2 Transcription of Human Colon Cancer Cells in Serum-Depleted Culture: The Involvement of CREB Transcription Factor (2015)
  • 著者名/発表者名: Mizutani N, Omori Y, Tanaka K, Ito H, Takagi A, Kojima T, Nakatochi M, Ogiso H, Kawamoto Y, Nakamura M, Suzuki M, Kyogashima M, Tamiya-Koizumi K, Nozawa Y, Murate T
  • 雑誌名: J Cell Biochem 巻: 116 ページ: 2227-2238
  • DOI: 10.1002/jcb.25173
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [学会発表] 1.Targeting CERS6-dependent Sphingolipid Pathway in Lung Cancer Cells (2015)
  • 著者名/発表者名: Motoshi Suzuki, Takashi Murate, Mamoru Kyogashima and Takashi Takahashi
  • 学会等名: 第74回日本癌学会総会
  • 発表場所: 愛知県名古屋市名古屋国際会議場
  • 年月日: 2015-10-08 – 2015-10-08