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2015 年度 実績報告書

二次元培養下での脱分化軟骨細胞の再分化促進因子/低分子化合物の網羅的探索

研究課題

研究課題/領域番号 26670662
研究機関京都大学

研究代表者

藤田 香里  京都大学, iPS細胞研究所, 特定研究員 (10633092)

研究期間 (年度) 2014-04-01 – 2016-03-31
キーワード軟骨細胞 / 脱分化 / 再分化 / 低分子化合物ライブラリー / siRNA ライブラリー
研究実績の概要

化合物ライブラリーによる脱分化型軟骨細胞の再分化を誘導する候補化合物を1次、2次スクリーニングによりピックアップした。しかしながら、これまでの実験より、脱分化阻止や再分化には10日前後の培養基間が必要なことが判ってきたため、化合物添加を2回行い、最終的に10日間の培養を行う系に変更し、1次スクリーニングを行った。現在、1次スクリーニングの再現性と2次スクリーニングの実施を検討中である。
siRNAライブラリースクリーニングでは、導入効率やノックダウン効率などの実験の基本となる部分は昨年度に完了していた。しかしながら、前述のように脱分化阻止や再分化には10日前後の培養基間が必要であり、導入したsiRNAの効果が平均3~4日であることから、siRNAの導入を2~3回行い10日間の培養を試みた。2~3回のsiRNAの導入は、導入試薬の影響と思われるダメージを細胞に与えることが判明した。現在、shRNAライブラリーの使用に移行し、脱分化阻止の系を行い、候補分子の同定まで終了した。

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公開日: 2017-01-06  

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