生体共焦点・多光子イメージングによる内耳聴覚生理と病態生理の解明

2015 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 26670738
• 研究機関: 東京大学
• 研究代表者: 松本 有 東京大学, 医学部附属病院, 助教 (80548553)
• 研究期間 (年度): 2014-04-01 – 2016-03-31
• キーワード: 耳科学 / 生体イメージング

研究実績の概要

初年度の報告で解決出来なかった「蛍光カルシウムインジケーターのloading条件」について引き続き検討した。FLUO-4AMよりはOregon Green 488 BAPTA-1 AMの方がS/N比が改善した。他の試薬は大差なかった。また体動の抑制についてもさらに検討を行った。モルモットはマウスに比べて大型なので呼吸によるブレも大きい。頭部をさらにしっかりと固定できるような金具を考案した。気管切開をして人工呼吸器に繋ぐと、撮影時間だけ呼吸を止めておくことが出来る。蝸牛頂回転を開窓しOregon Green 488 BAPTA-1 AMを用いてloadingした。外耳道に挿入したイヤホンから音響刺激を行い、Nikon A1R高速共焦点顕微鏡を用いて撮影した。外有毛細胞にROIを設定し、蛍光強度の経時的変化を解析した。音響刺激に一致して外有毛細胞のカルシウム濃度上昇を捉えることに成功した。また活性酸素検出用蛍光試薬であるAminophenyl Fluorescein (APF)およびHydroxyphenyl Fluorescein (HPF)を用い、ミトコンドリア電子伝達系酵素阻害剤であるアンチマイシンAの直接滴下によりラセン神経節近傍の活性酸素産生を直接検出することに成功した。引き続き再現性を確認するための実験や、最近発売となった新たな蛍光試薬の試用、刺激音の調整などを行っている。

研究成果

• [雑誌論文] Systemically Injectable Enzyme-Loaded Polyion Complex Vesicles as in Vivo Nanoreactors Functioning in Tumors (2016)
  • 著者名/発表者名: Anraku Y, Kishimura A, Kamiya M, Tanaka S, Nomoto T, Toh K, Matsumoto Y, Fukushima S, Sueyoshi D, Kano MR, Urano Y, Nishiyama N, Kataoka K
  • 雑誌名: Angew Chem Int Ed Engl 巻: 55 ページ: 560-5
  • DOI: 10.1002/anie.201508339
  • 査読あり
• [雑誌論文] Enhanced Efficacy against Cervical Carcinomas through Polymeric Micelles Physically Incorporating the Proteasome Inhibitor MG132 (2016)
  • 著者名/発表者名: Matsumoto Y, Miyamoto Y, Cabral H, Matsumoto Y, Nagasaka K, Nakagawa S, Yano T, Maeda D, Oda K, Kawana K, Nishiyama N, Kataoka K, Fujii T
  • 雑誌名: Cancer Science 巻: in press ページ: in press
  • DOI: 10.1111/cas.12926
  • 査読あり
• [雑誌論文] Vascular Bursts Enhance Permeability of Tumour Blood Vessels and Improve Nanoparticle Delivery (2016)
  • 著者名/発表者名: Matsumoto Y, Nichols JW, Toh K, Nomoto T, Cabral H, Miura Y, Christie RJ, Yamada N, Ogura T, Kano MR, Matsumura Y, Nishiyama N, Yamasoba T, Bae YH, Kataoka K
  • 雑誌名: Nat Nanotechnol 巻: in press ページ: in press
  • DOI: 10.1038/nnano.2015.342
  • 査読あり / 国際共著 / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Systemic Delivery of Sirna by Actively Targeted Polyion Complex Micelles for Silencing the E6 and E7 Human Papillomavirus Oncogenes (2016)
  • 著者名/発表者名: Nishida H, Matsumoto Y, Kawana K, Christie RJ, Naito M, Kim BS, Toh K, Min HS, Yi Y, Matsumoto Y, Kim HJ, Miyata K, Taguchi A, Tomio K, Yamashita A, Inoue T, Nakamura H, Fujimoto A, Sato M, Yoshida M, Adachi K, Arimoto T, Wada-Hiraike O, Oda K, Nagamatsu T, Nishiyama N, Kataoka K, Osuga Y, Fujii T
  • 雑誌名: J Control Release 巻: in press ページ: in press
  • DOI: 10.1016/j.jconrel.2016.03.016
  • 査読あり / 国際共著
• [雑誌論文] Calcium Phosphate-Based Organic–Inorganic Hybrid Nanocarriers with Ph-Responsive on/Off Switch for Photodynamic Therapy (2016)
  • 著者名/発表者名: Nomoto T, Fukushima S, Kumagai M, Miyazaki K, Inoue A, Mi P, Maeda Y, Toh K, Matsumoto Y, Morimoto Y, Kishimura A, Nishiyama N, Kataoka K
  • 雑誌名: Biomater. Sci. 巻: in press ページ: in press
  • DOI: 10.1039/c6bm00011h
  • 査読あり
• [雑誌論文] Analyzing Spatiotemporal Distribution of Uniquely Fluorescent Nanoparticles in Xenograft Tumors (2016)
  • 著者名/発表者名: Stirland DL, Matsumoto Y, Toh K, Kataoka K, Bae YH
  • 雑誌名: J Control Release 巻: in press ページ: in press
  • DOI: 10.1016/j.jconrel.2016.02.016
  • 査読あり / 国際共著
• [雑誌論文] Design of High-Performance Anti-Adhesion Agent Using Injectable Gel with an Anti-Oxidative Stress Function (2015)
  • 著者名/発表者名: Nakagawa H, Matsumoto Y, Matsumoto Y, Miwa Y, Nagasaki Y
  • 雑誌名: Biomaterials 巻: 69 ページ: 165-73
  • DOI: 10.1016/j.biomaterials.2015.08.018
  • 査読あり
• [雑誌論文] Crgd-Installed Polymeric Micelles Loading Platinum Anticancer Drugs Enable Cooperative Treatment against Lymph Node Metastasis (2015)
  • 著者名/発表者名: Makino J, Cabral H, Miura Y, Matsumoto Y, Wang M, Kinoh H, Mochida Y, Nishiyama N, Kataoka K
  • 雑誌名: J Control Release 巻: 220 ページ: 783-91
  • DOI: 10.1016/j.jconrel.2015.10.017
  • 査読あり
• [雑誌論文] Ternary Polyplex Micelles with Peg Shells and Intermediate Barrier to Complexed DNA Cores for Efficient Systemic Gene Delivery (2015)
  • 著者名/発表者名: Li J, Chen Q, Zha Z, Li H, Toh K, Dirisala A, Matsumoto Y, Osada K, Kataoka K, Ge Z
  • 雑誌名: J Control Release 巻: 2015 ページ: 77-87
  • DOI: 10.1016/j.jconrel.2015.04.024
  • 査読あり / 国際共著
• [雑誌論文] Density-Tunable Conjugation of Cyclic Rgd Ligands with Polyion Complex Vesicles for the Neovascular Imaging of Orthotopic Glioblastomas (2015)
  • 著者名/発表者名: Kawamura W, Miura Y, Kokuryo D, Toh K, Yamada N, Nomoto T, Matsumoto Y, Sueyoshi D, Liu X, Aoki I, Kano MR, Nishiyama N, Saga T, Kishimura A, Kataoka K
  • 雑誌名: Science and Technology of Advanced Materials 巻: 16 ページ: 035004
  • DOI: 10.1088/1468-6996/16/3/035004
  • 査読あり
• [雑誌論文] Systemic Targeting of Lymph Node Metastasis through the Blood Vascular System by Using Size-Controlled Nanocarriers (2015)
  • 著者名/発表者名: Cabral H, Makino J, Matsumoto Y, Mi P, Wu H, Nomoto T, Toh K, Yamada N, Higuchi Y, Konishi S, Kano MR, Nishihara H, Miura Y, Nishiyama N, Kataoka K
  • 雑誌名: ACS Nano 巻: 9 ページ: 4957-67
  • DOI: 10.1021/nn5070259
  • 査読あり
• [学会発表] Tips and Tricks in Transcanal Endoscopic Ear Surgery (2015)
  • 著者名/発表者名: Matsumoto Y
  • 学会等名: 13th Japan-Taiwan Conference on Otolaryngology-Head and Neck Surgery
  • 発表場所: Hitotsubashi Hall, National Center of Sciences, Tokyo, Japan
  • 年月日: 2015-12-04
  • 国際学会 / 招待講演
• [学会発表] Intravital Imaging of Drug Delivery Systems (2015)
  • 著者名/発表者名: Matsumoto Y
  • 学会等名: 2015 Conference on Developmental Biology Scientific & Drug Delivery System Program
  • 発表場所: Academia Sinica, Taipei, Taiwan
  • 年月日: 2015-11-10
  • 国際学会 / 招待講演
• [学会発表] 高齢者の人工聴覚器（人工中耳・人工内耳）の適応・実施上の留意点 (2015)
  • 著者名/発表者名: 松本 有
  • 学会等名: 第25回日本耳科学会総会・学術講演会
  • 発表場所: 長崎ブリックホール、長崎県長崎市
  • 年月日: 2015-10-09
  • 招待講演
• [学会発表] Intravital Confocal / Two Photon Microscopy (2015)
  • 著者名/発表者名: Matsumoto Y
  • 学会等名: NIS 8th Nikon Microscope Image Forum
  • 発表場所: Haifeng International Hotel, Haidong City, Qinghai, China
  • 年月日: 2015-07-28
  • 国際学会 / 招待講演