| 研究課題/領域番号 |
26670755
|
|---|
| 研究機関 | 山口大学 |
|---|
研究代表者 |
園田 康平 山口大学, 医学(系)研究科(研究院), 教授 (10294943)
|
|---|
| 研究分担者 |
柳井 亮二 山口大学, 医学部附属病院, 講師 (10346554)
森重 直行 山口大学, 医学(系)研究科(研究院), 講師 (40346565)
|
|---|
| 研究期間 (年度) |
2014-04-01 – 2017-03-31
|
| キーワード | 最終糖化産物 / ヘモグロビン / 基底膜散乱 / 生体検査 / 非侵略的検出 |
|---|
| 研究実績の概要 |
当該年度では，1.糖尿病動物の作成および動物モデルにおける基底膜AGE化の検討，2.励起光のスクリーニングを行った。
1.4～6週齢のWhister ratに対しstreptozotocin 70mg/kg BWを腹腔内投与し，Ｉ型糖尿病モデルを作成した。基剤のみを投与した対照群では血糖値が70～150mg/dlで推移したのに対し，Streptozotocin投与群では，Streptozotocinの１回または２回投与で全て血糖値が300～600mg/dlの高血糖値を呈し，かつ尿糖が4+陽性を呈するようになった。糖尿病導入後3ヶ月で眼球を摘出し，抗AGE抗体で免疫染色を行ったが，角膜上皮基底膜，デスメ膜，結膜上皮基底膜，水晶体嚢，結膜血管内皮のAGE化は観察されなかった。
2.正常眼球を摘出し，多光子顕微鏡システムを用いて，角膜上皮基底膜部分のspectrumパターンを採取した。対照群から得られた正常角膜では，予想される角膜上皮基底膜における780nmでの反射光像鏡は観察されなかった。Streptozotocin投与群における３ヶ月間糖尿病状態とした糖尿病動物モデル角膜におけるspectrumパターンを採取したが，正常角膜と同様のspectrumパターンを示した。同様に，結膜の上皮基底膜の部分の780nm励起光による反射光の評価を行ったが，対照群とStreptozotocin投与群との間に明らかな差異は見られなかった。当該年度の検討から，長期間にわたる糖尿病状態が角膜上皮基底膜のAGE化に必要であることが示唆された。
|
| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
糖尿病動物の作成については順調に行うことができており，現状では糖尿病罹病期間が必要であることが明らかとなっている。今後の問題点が明らかになっており，次年度以降で研究を推進できると考えている。
|
| 今後の研究の推進方策 |
現在，長期罹病糖尿病モデルを作成，飼育している。これらのモデルを用いて安定した組織変化を検出し，ヒト検体への応用及びin vivoモデルでのAGE検出を進めていく予定である。
|
| 次年度使用額が生じた理由 |
本年度は動物モデルの作成が中心となり，免疫染色用の抗体使用量が少なくなったため、未使用額が生じた。
|
| 次年度使用額の使用計画 |
次年度以降は抗体使用量が増加するため，次年度使用予算を充てる予定にしている。
|
