| 研究実績の概要 |
研究方法 1.歯髄組織処理：インフォームドコンセントを行って得られたダウン症（21番染色体トリソミー）2名および同年齢の健常人2名の歯髄細胞を用いた。歯髄組織を洗浄後、組織片をフラスコに接着させ、血清入り培地で37℃、5%CO2、20%O2の条件下で培養を開始した。継代培養し細胞を回収後、細胞数を計測した。２.骨芽細胞分化誘導：D-MEM(low glucose)+10%FBS に①1%Ascorbic acid②1%Ascorbic acid(Takara MK430)＋2%βGlycerphosphateを添加し、合計10日間培養した。３. 定量的PCR：①と②の培地条件で培養した細胞からRNAを抽出し、定量的PCRにより21番染色体上のUSP16,DYRK1A のmRNA発現、骨関連遺伝子(ALP, COL1A1, COL1A2, BMP2, RUNX2, RUNX1, RANKL, M-CSF Osteocalcin, Osteonectin, Osteopontin, Osteoprotegerin）を調べた。
研究結果 ダウン症患者において、21番染色体上のUSP16とDYRK1AのmRNAの発現が約1.5倍上昇、骨関連遺伝子のⅠ型コラーゲン（COL1A1、COL1A2）、Osteonectinの発現については有意な上昇が認められた。NFATC1はダウン症で発現が低く、ALP、M-CSFについては発現が高い傾向があった。RUNX2、BMP2については差が認められなかった。
考察 ダウン症患者において発現が高かったOsteonectinは象牙芽細胞の分化初期における形態変化や増殖、象牙質の基質形成、石灰化に関与し、骨の石灰化の際、アパタイト形成のinitiatorとして働き、アパタイトとコラーゲンを結合させる役割を持つ。同様に、Ⅰ型コラーゲンは、前骨芽細胞、骨芽細胞、骨細胞に存在する。本研究より、ダウン症の病態に骨芽細胞分化が影響していることが示された。
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