| 研究課題/領域番号 |
26711014
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| 研究機関 | 大阪大学 |
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研究代表者 |
今井 薫 (佐藤薫) 大阪大学, 理学(系)研究科(研究院), 准教授 (00447921)
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| 研究期間 (年度) |
2014-04-01 – 2018-03-31
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| キーワード | 遺伝子発現制御 |
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| 研究実績の概要 |
これまでの研究で、胚発生の時期に発現する調節遺伝子を含むマイクロシンテニーに注目し、時空間的な発現パターンの解析をおこない、マイクロシンテニー内の遺伝子の特徴づけをおこなった。その結果左右相称動物で保存されているマイクロシンテニー（そのうちホヤにも存在するマイクロシンテニー）のうち３０個についてホヤの胚発生期における遺伝子発現を解析したところ、２２個は胚発生の時期に発現が見られた。そのすべての例でマイクロシンテニー内の遺伝子は同じ時期に同じ細胞・組織に発現していなかった。このうちの１つのマイクロシンテニーに注目して解析を進めている。このマイクロシンテニー含まれる２つの遺伝子は、隣り合う細胞で空間的に相補的な発現パターンを示した。また、モルフォリノオリゴヌクレオチドを用いた阻害実験では２つの遺伝子が反対の機能もつという結果が明らかになりつつある。また、このマイクロシンテニー内の２つの遺伝子の転写制御のメカニズムを明らかにすべく、詳しい機能解析、及び、遺伝子のエンハンサー解析をおこなった。具体的には２つの遺伝子にまたがるゲノム領域を単離し、それぞれの遺伝子をGEPとRFPレポーター遺伝子に置き換えたコンストラクトを作成し、レポーター解析を行った。それにより、片方、あるいは両方の遺伝子の発現に必要なゲノム領域を絞ることができた。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
胚発生の時期に発現する調節遺伝子を含むマイクロシンテニーの一つについて、その機能と転写制御の解析が進んでいる。
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| 今後の研究の推進方策 |
１つのマイクロシンテニーに注目して解析を進めている。このマイクロシンテニー含まれる２つの遺伝子は、隣り合う細胞で空間的に相補的な発現パターンを示す。昨年度に引き続き、このマイクロシンテニー内の２つの遺伝子の転写制御のメカニズムを明らかにすべく、詳しい機能解析、及び、遺伝子のエンハンサー解析を進めていく。具体的には２つの遺伝子にまたがるゲノム領域を単離し、それぞれの遺伝子をGEPとRFPレポーター遺伝子に置き換えたレポーターコンストラクトを作成し、レポーター解析を行う。昨年度からのレポーター解析により各遺伝子の組織ごとの発現に必要なDNA領域が絞られてきた。今年度はさらに解析を進め、片方、あるいは両方の遺伝子の発現に必要なゲノム上のエンハンサー領域を特定する。この２つの遺伝子の機能解析については、モルフォリノオリゴヌクレオチドを用いた阻害実験によって２つの遺伝子が互いに反対の機能もつという結果が明らかになってきた。今年度はさらに様々なマーカー遺伝子を用いて詳しく表現型の機能解析を行いたい。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
28年度に行う実験の一部が２８年度内に終了せず２９年度に引き続き行う予定である。そのため実験に使用する試薬の一部を購入しなかった。
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| 次年度使用額の使用計画 |
２８年度に行う予定で、２９年度に行うことになった実験のための試薬購入にあてる
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