アカパンカビ子嚢胞子は山火事で発生した約50℃を超える熱、もしくは煙成分を感知して休眠解除する。これまでのKOライブラリーを用いた大規模スクリーニングより、アカパンカビ子嚢胞子が休眠を維持する、そして、山火事の煙成分で目覚めるなどの複数のシグナル伝達経路を同定した。 同定した休眠維持因子群は、リン酸化をリレーするMAPキナーゼカスケードを形成し、このMAPキナーゼのリン酸化が休眠時に維持され、常活性化されているが、熱処理後の能動的な脱リン酸化により不活性化し、休眠が解除されることがわかった。次に、このリン酸化部位へ特異的なポイントミューテーション株を作製した。ウェスタンブロット解析により、正常な蛋白質発現と特異的なリン酸化阻害、そして、表現型解析により子嚢胞子の休眠維持の阻害を確認した。これらの一連の解析により、このMAPキナーゼカスケードのリン酸化による常活性化が休眠維持に重要な役割を担うことを明らかにした。 一方、本課題の鍵因子である山火事の熱を感知する温度センサーと煙成分を直接感知する受容体の同定はできてない。この理由として、鍵因子が生存に不可欠、もしくは機能が重複しているために同定できなかったと考え、逆に過剰発現させて機能を増強すれば、本課題を克服できるという発想に至った。そこで、これらの実験系を構築し、表現型解析を行ったところ、未知の温度センサー候補の同定に成功した。同様にして煙成分を感知する受容体の同定を試みている。
|