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本申請研究は、「レジオネラ感染経路に関与するRabタンパク質の同定」、「LCVのリソソーム融合阻害機構の解析」、「レジオネラ感染に関与する小胞体サブドメインの同定」を主体として行なっており、各々の進捗状況を以下に記載する。
「レジオネラ感染経路に関与するRabタンパク質の同定」においては、昨年度までにRab33bをLCVへとリクルートするレジオネラエフェクターをコードしている遺伝子群の同定まで完了していた。本年度は、当該遺伝子群にコードされている全レジオネラエフェクターのクローニングを完了させ、Rab33bとの局在比較及び結合解析を行なった。その結果、Rab33bをLCVへと供給させるレジオネラエフェクターの絞り込みに成功した。
「LCVのリソソーム融合阻害機構の解析」においては、昨年度までにRab5をユビキチン化するE3ライゲースとして働くレジオネラエフェクターの単離まで完了していた。本年度は、当該エフェクター内に存在するE3ライゲース活性部位（Fbox領域）を同定し、本領域内において保存されたシステイン残基の変異によりRab5のユビキチン活性が消失することも明らかにしている。なお、本エフェクターの遺伝子を破壊したレジオネラ株の感染においてもRab5のユビキチン化が消失することを確認している。
「レジオネラ感染に関与する小胞体サブドメインの同定」においては、昨年度までに滑面小胞体と粗面小胞体を循環する宿主タンパク質であるBap31の機能を制御するレジオネラエフェクターをコードする遺伝子群を同定した。本年度は、当該遺伝子群にコードされている各々のレジオネラエフェクターの局在及びBap31との結合解析により、Bap31と共局在し結合するレジオネラエフェクターの絞り込みまで成功した。
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