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2015 年度 実績報告書

水和イオン液体を用いたタンパク質凝集体の再生

研究課題

研究課題/領域番号 26810066
研究機関東京農工大学

研究代表者

藤田 恭子  東京農工大学, 工学(系)研究科(研究院), 講師 (90447508)

研究期間 (年度) 2014-04-01 – 2016-03-31
キーワードイオン液体 / リフォールディング / タンパク質 / 水和状体
研究実績の概要

本研究は、タンパク質の高次構造を保持したまま溶解可能な水和イオン液体を用いて、タンパク質凝集体のリフォールディングの検討を行った。大腸菌を宿主として異種発現した際に形成したセルラーゼ封入体を用いて検討を行った。破砕した大腸菌から得られた封入体をコリニウムカチオン([ch])とリン酸二水素アニオン([dhp])からなり、1イオンペアに対して4分子程度の水が存在するよう調整を行った水和[ch][dhp]中で撹拌を行った。撹拌後の上清について各種分光測定を行った結果、可溶体と類似した二次構造を有し、フォールディング状体を形成していることが明らかとなった。さらに、水和[ch][dhp]の水和状体が及ぼす封入体の溶解性への影響、溶解後のフォールディング状体への影響について検討を行った結果、水和数が1イオンペアに対して4分子程度が、溶解後のフォールディング状体が可溶体に類似した状体での溶解性が高く、水和数が上昇するに従い溶解性は下がり、また溶解後のフォールディング状体も可溶体とは異なることが示唆された。
また、糖鎖認識タンパク質であるコンカナバリンA(ConA)をターゲットとして、水和[ch][dhp]に溶解したところ、高温下でアンフォールディング後に温度を戻すことでのリフォールディング挙動が観測された。水溶液系ではこのようなリフォールディング挙動は観測されなかった。水和[ch][dhp]リフォールディング後の糖鎖認識能について解析を行った結果、アンフォールディング前と同等の糖鎖認識能を保持していることを明らかとした。

  • 研究成果

    (18件)

すべて 2016 2015

すべて 雑誌論文 (4件) (うち査読あり 4件、 謝辞記載あり 4件) 学会発表 (13件) (うち国際学会 9件、 招待講演 1件) 図書 (1件)

  • [雑誌論文] Fast electron transfer reaction of azurin fixed on the modified electrode in hydrated ionic liquids2016

    • 著者名/発表者名
      K. Fujita, J. Kuwahara, N. Nakamura, H. Ohno
    • 雑誌名

      Journal of The Electrochemical Society

      巻: 163 ページ: G79-G81

    • DOI

      10.1149/2.0301607jes

    • 査読あり / 謝辞記載あり
  • [雑誌論文] Sugar chain-binding specificity and native folding state of lectin preserved in hydrated ionic liquids2015

    • 著者名/発表者名
      K. Fujita, M. Sanada, H. Ohno
    • 雑誌名

      Chem. Commun.

      巻: 51 ページ: 10883-10886

    • DOI

      10.1039/c5cc03142g

    • 査読あり / 謝辞記載あり
  • [雑誌論文] Is seven the minimum number of water molecules per ion pair for assured biological activity in ionic liquid-water mixtures?2015

    • 著者名/発表者名
      H. Ohno, K. Fujita, Y. Kohno
    • 雑誌名

      Phys. Chem. Chem. Phys.

      巻: 17 ページ: 14454-14460

    • DOI

      10.1039/c5cp00768b

    • 査読あり / 謝辞記載あり
  • [雑誌論文] A simple recovery process for biodegradable plastics accumulated in cyanobacteria treated with ionic liquids2015

    • 著者名/発表者名
      D. Kobayashi, K. Fujita, N. Nakamura, H. Ohno
    • 雑誌名

      Appl Microbiol Biotechnol

      巻: 99 ページ: 1647-1653

    • DOI

      10.1007/s00253-014-6234-1

    • 査読あり / 謝辞記載あり
  • [学会発表] 水和イオン液体/可溶化剤混合系を用いたコンカナバリンA凝集体の再生2016

    • 著者名/発表者名
      吉岡大輔・藤田恭子・大野弘幸
    • 学会等名
      第65回高分子学会年次大会
    • 発表場所
      神戸国際会議場、神戸市、神戸
    • 年月日
      2016-05-25
  • [学会発表] Hydrated Ionic Liquids as Effective Solvent of Renaturation of Aggregated Recombinant Cellulase Expressed in Escherichia Coli2015

    • 著者名/発表者名
      Mayuko Kajiyama, Kyoko Fujita, Hiroyuki Ohno
    • 学会等名
      The International chemical congress of pacific basin societies 2015
    • 発表場所
      Honolulu, USA
    • 年月日
      2015-12-15 – 2015-12-20
    • 国際学会
  • [学会発表] Improvement of Sugar Chain Recognition of Lectin in Hydrated Ionic Liquid2015

    • 著者名/発表者名
      Miki Sanada, Kyoko Fujita, Hiroyuki Ohno,
    • 学会等名
      The International chemical congress of pacific basin societies 2015
    • 発表場所
      Honolulu, USA
    • 年月日
      2015-12-15 – 2015-12-20
    • 国際学会
  • [学会発表] Control of redox state of cytochrome c to regulate distribution behaviour in ionic liquids/ buffer system2015

    • 著者名/発表者名
      Kazuma Ikeda, Kyoko Fujita, Hiroyuki Ohno Nobuhumi Nakamura
    • 学会等名
      The International chemical congress of pacific basin societies 2015
    • 発表場所
      Honolulu, USA
    • 年月日
      2015-12-15 – 2015-12-20
    • 国際学会
  • [学会発表] Effectiveness of Ionic Liquids for Recovery Process of Useful Substrates Accumulated in Cyanobacteria2015

    • 著者名/発表者名
      Kyoko Fujita, Daigo Kobayashi, Nobuhumi Nakamura, Hiroyuki Ohno
    • 学会等名
      The International chemical congress of pacific basin societies 2015
    • 発表場所
      Honolulu, USA
    • 年月日
      2015-12-15 – 2015-12-20
    • 国際学会
  • [学会発表] Characterization of aptamer forming G-quadruplex structure and its binding to target molecules in hydrated ionic liquid2015

    • 著者名/発表者名
      Takuya Honda, Koichi Abe, Kyoko Fujita, Hiroyuki Ohno, Kazunori Ikebukuro
    • 学会等名
      The International chemical congress of pacific basin societies 2015
    • 発表場所
      Honolulu, USA
    • 年月日
      2015-12-15 – 2015-12-20
    • 国際学会
  • [学会発表] 水和イオン液体を用いたレクチンの保存とリフォールディング挙動の検討2015

    • 著者名/発表者名
      真田美希、藤田恭子、大野弘幸
    • 学会等名
      第24回ポリマー材料フォーラム
    • 発表場所
      タワーホール船堀、江戸川区、東京都
    • 年月日
      2015-11-26
  • [学会発表] 水和コリニウム系イオン液体中に溶解したコンカナバリンAの糖鎖結合能の検討2015

    • 著者名/発表者名
      真田美希 藤田恭子 大野弘幸
    • 学会等名
      第6回イオン液体討論会
    • 発表場所
      同志社大学寒梅館、京都市、京都
    • 年月日
      2015-10-26
  • [学会発表] LCST型挙動を示すイオン液体/緩衝液二相系でのシトクロムcの電気化学的な分配制御2015

    • 著者名/発表者名
      池田一磨、藤田恭子、大野弘幸、中村暢文
    • 学会等名
      第6回イオン液体討論会
    • 発表場所
      同志社大学寒梅館、京都市、京都
    • 年月日
      2015-10-26
  • [学会発表] Recovery process for materials accumulated in cyanobacteria treated with ionic liquids2015

    • 著者名/発表者名
      Kyoko Fujita
    • 学会等名
      CyanoFactory Meeting Bochum 2015
    • 発表場所
      Bochum, Germany
    • 年月日
      2015-10-01
    • 国際学会 / 招待講演
  • [学会発表] Preservation of Lectin in Hydrated Ionic Liquid2015

    • 著者名/発表者名
      Miki Sanada, Kyoko Fujita, Hiroyuki Ohno
    • 学会等名
      5th International Congress on Ionic Liquids
    • 発表場所
      Jeju, Koria
    • 年月日
      2015-06-17
    • 国際学会
  • [学会発表] Renaturation of Aggregated Recombinant Cellulase Expressed in Escherichia Coli by Dissolution in Hydrated Ionic Liquids2015

    • 著者名/発表者名
      Mayuko Kajiyama, Kyoko Fujita, Hiroyuki Ohno
    • 学会等名
      5th International Congress on Ionic Liquids
    • 発表場所
      Jeju, Koria
    • 年月日
      2015-06-17
    • 国際学会
  • [学会発表] Recovery Process for Biodegradable Plastics Accumulated in Cyanobacteria Treated with Ionic Liquids2015

    • 著者名/発表者名
      Kyoko Fujita, Daigo Kobayashi, Nobuhumi Nakamura, Hiroyuki Ohno
    • 学会等名
      5th International Congress on Ionic Liquids
    • 発表場所
      Jeju, Koria
    • 年月日
      2015-06-17
    • 国際学会
  • [図書] Analytical Applications of Ionic Liquids2016

    • 著者名/発表者名
      M. Koel, C. Chiappe, K. Fujita, J. Gebicki, E. Lust, C. Zhao, A. Mele, A. Mudring, J. Namiesnik, S. Dai, M. Freire, J. Brenneke, M.Vaher, H. Ohno, V. Pino
    • 総ページ数
      印刷中
    • 出版者
      World scientific Publishing UK Ltd

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公開日: 2017-01-06  

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