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2014 年度 実施状況報告書

tRNAの新規成熟経路の解析と5’キャップによる成熟制御機構の解析

研究課題

研究課題/領域番号 26840005
研究機関東京大学

研究代表者

大平 高之  東京大学, 工学(系)研究科(研究院), 助教 (90727520)

研究期間 (年度) 2014-04-01 – 2016-03-31
キーワードtRNA / 成熟化 / 5'キャップ
研究実績の概要

平成26年度の計画のうち、①「新規tRNA成熟経路に関わるtRNA輸送因子の同定」については、新規成熟経路において核外輸送を担う因子の絞り込みを行い、絞り込んだ因子の発現制御株を用い解析を行ったところ、発現抑制条件下において新規成熟経路の成熟過程で生じるユニークな中間体が消失することを確認した。これは、この輸送因子が新規成熟経路における核外輸送因子であることを強く示唆する結果である。②「tRNA成熟経路の選択機構の解明」については、様々なRNA修飾酵素の遺伝子欠損株を用い解析を行った。その結果、期待通りこれら株においてユニークな中間体の蓄積量の増加が確認された。これは成熟経路の選択に前駆体tRNAにおけるRNA修飾の状態が影響しており、修飾率が低いほど新規成熟経路に流入しやすくなることを示唆している。③「前駆体tRNAに見出された5’キャップの生合成機構の解析」については、生合成に関わると考えられる既知の酵素の遺伝子欠損株あるいは発現制御株を作成し、それらにおいて前駆体tRNAの5'キャップ形成が阻害されるかどうか解析を行った。その結果、これら遺伝子を欠損あるいは発現を抑制した株において、前駆体tRNAにおける5'キャップの形成阻害が観察された。この結果は、前駆体tRNAの5'キャップは既知のキャップ生合成機構により形成されることを示しており、また、tRNAとmRNAやncRNAの成熟化が厳密に区別されているものではなく、その境界は曖昧であることを示唆している。

現在までの達成度 (区分)
現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

平成26年度の計画のうち、①「新規tRNA成熟経路に関わるtRNA輸送因子の同定」については、候補因子の絞り込みを行い、その因子が新規成熟経路における核外輸送因子であることを強く示唆する結果を得ることに成功した。②「tRNA成熟経路の選択機構の解明」については、様々なRNA修飾酵素の遺伝子欠損株を用いた解析から、成熟経路の選択と前駆体tRNAにおけるRNA修飾との関連性が見出された。③「前駆体tRNAに見出された5’キャップの生合成機構の解析」については、前駆体tRNAの5'キャップ形成は既知のキャップ生合成機構が行っていることを明らかにした。

今後の研究の推進方策

平成27年度は計画通りに実験を進める予定である。まず、26年度において新規tRNA成熟経路との関連が示唆された輸送因子が実際に前駆体tRNAと複合体を形成していることを証明する。次いで、その輸送因子がどのようにして前駆体tRNAを認識しているのかその認識機構について解析を行う。さらには、その際におけるRNA修飾の影響についても解析を行う。5'キャップについては生合成機構を明らかにしたので、次にその機能及び生理学的意義について解析を行う。

  • 研究成果

    (1件)

すべて 2014

すべて 学会発表 (1件)

  • [学会発表] Pre-tRNA capping2014

    • 著者名/発表者名
      Takayuki Ohira and Tsutomu Suzuki
    • 学会等名
      25th tRNA conference 2014
    • 発表場所
      Kyllini Peloponnese, Greece
    • 年月日
      2014-09-21 – 2014-09-25

URL: 

公開日: 2016-06-01  

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