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2015 年度 実績報告書

個々の要素分子の動態を同時計測して生体分子システムの動作原理を探る

研究課題

研究課題/領域番号 26840057
研究機関国立研究開発法人理化学研究所

研究代表者

市村 垂生  国立研究開発法人理化学研究所, 生命システム研究センター, 研究員 (50600748)

研究期間 (年度) 2014-04-01 – 2016-03-31
キーワード生物物理 / 一分子計測
研究実績の概要

前年度までに構築した波長分離型の超解像顕微鏡システムを利用して、筋肉を構成するミオシンフィラメント(ミオシン2)の複数のヘッドの動態計測に取り組んだ。ミオシンフィラメントはミオシンの自己組織化によって作製した。この際、ヘッドの個数を数個のオーダーに制御するために、ヘッドの無いミオシンフィラメント(ミオシンロッド)を一定の比率で混在させた。また、蛍光プローブとして7色の量子ドットを用い、自己組織化する前のヘッドに対してビオチンアビジン結合を介して標識した。顕微鏡で観察した結果、同一フィラメント上で動作する複数のミオシンヘッドを観察することができた。
また、上記の計測では1次元方向の座標の変位を検出していたが、将来の応用のために2次元計測を可能とする光学系を設計、試作した。この方法では、蛍光像の信号を2光路に分岐し、一方の光路で画像を回転し、両方の光路を分光器に導いた。それぞれの画像でxおよびy座標を推定することができる。ここで、同じ量子ドット由来の2つの蛍光輝点をペアリングするために、各輝点の強度揺らぎの時間プロファイルの間の相関係数を用いることを提案し、方法論を構築した。統計的有意な相関係数とフレーム数の関係を実験とシミュレーションにより明らかにした。この方法を用いて、実際に1本のアクチンフィラメント上の複数のミオシン5の運動を、2次元的にトラッキングすることに成功した。
これらの研究成果をまとめた論文を執筆し、研究期間終了時までに科学専門誌に投稿した。

  • 研究成果

    (8件)

すべて 2016 2015

すべて 雑誌論文 (6件) (うち査読あり 6件) 学会発表 (2件)

  • [雑誌論文] Full control of polarization state with a pair of electro-optic modulators for polarization-resolved optical microscopy2016

    • 著者名/発表者名
      Junichi Kaneshiro, Tomonobu. M. Watanabe, Hideaki Fujita, Taro Ichimura
    • 雑誌名

      Applied Optics

      巻: 55 ページ: 1082-1089

    • DOI

      10.1364/AO.55.001082

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Dependence of fluorescent protein brightness on protein concentration in solution and enhancement of it2016

    • 著者名/発表者名
      Takamitsu J. Morikawa, Hideaki Fujita, Akira Kitamura, Takashi Horio, Johtaro Yamamoto, Masataka Kinjo, Akira Sasaki, Hiroaki Machiyama, Keiko Yosizawa, Taro Ichimura, Katsumi Imada, Takeharu Nagai, Tomonobu M. Watanabe
    • 雑誌名

      Scientific Reports

      巻: 6 ページ: 22342

    • DOI

      10.1038/srep22342

    • 査読あり
  • [雑誌論文] ラマン散乱スペクトルによる細胞指紋法の提案2016

    • 著者名/発表者名
      渡邉朋信、市村垂生、藤田英明
    • 雑誌名

      BIO INDUSTRY

      巻: 33 ページ: 19-25

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Visualizing the appearance and disappearance of the attractor of differentiation using Raman spectral imaging2015

    • 著者名/発表者名
      Taro Ichimura, Liang-da Chiu, Katsumasa Fujita, Hiroaki Machiyama, Satoshi Kawata, Tomonobu M. Watanabe, Hideaki Fujita
    • 雑誌名

      Scientific Reports

      巻: 5 ページ: 11358

    • DOI

      10.1038/srep11358

    • 査読あり
  • [雑誌論文] 局在表面プラズモンを利用した超解像顕微分光とイメージング2015

    • 著者名/発表者名
      市村垂生、矢野隆章
    • 雑誌名

      分光研究

      巻: 64 ページ: 582-598

    • 査読あり
  • [雑誌論文] 細胞状態を示す指紋:細胞からのラマンスペクトル2015

    • 著者名/発表者名
      藤田英明、市村垂生、渡邉朋信
    • 雑誌名

      現代化学

      巻: 11 ページ: 36-40

    • 査読あり
  • [学会発表] 波長分離による複数分子ナノ追跡2015

    • 著者名/発表者名
      市村垂生, 垣塚太志, 池崎圭吾, 金城純一, 藤田英明, 渡邉朋信
    • 学会等名
      第56回応用物理学会年会
    • 発表場所
      名古屋国際会議場(愛知県・名古屋市)
    • 年月日
      2015-09-13 – 2015-09-16
  • [学会発表] ラマン散乱顕微鏡による細胞状態遷移の一細胞計測2015

    • 著者名/発表者名
      市村垂生, Liang-da Chiu, 藤田克昌, 渡邉朋信, 藤田英明
    • 学会等名
      日本顕微鏡学会第71回学術講演会
    • 発表場所
      国立京都国際会館(京都府・京都市)
    • 年月日
      2015-05-13 – 2015-05-15

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公開日: 2017-01-06  

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