| 研究課題/領域番号 |
26860069
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| 研究機関 | 東京薬科大学 |
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研究代表者 |
横須賀 章人 東京薬科大学, 薬学部, 講師 (20318190)
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| 研究期間 (年度) |
2014-04-01 – 2018-03-31
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| キーワード | 腫瘍細胞毒性 / アポトーシス / 微小管ダイナミクス / 分子標的 |
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| 研究実績の概要 |
植物由来がん分子標的治療薬シードの探索を目的に、本年度は、３種の生薬（防風、あすなろ葉、コンズランゴ）、３種のヒガンバナ科植物（Lycoris radiata、Galanthus elwesii、Haemanthus multiflorus）を研究材料として用いた。これらのメタノール抽出エキスと、抽出エキスを多孔質ポリスチレン樹脂で粗分画した５つの溶出画分（30%メタノール、50%メタノール、メタノール、エタノール、酢酸エチル）を調製し、HL-60ヒト白血病細胞に対する細胞毒性スクリーニングを行った。その結果、あすなろ葉、L. radiata、G. elwesii、H. multiflorusについては抽出エキスに活性［50%細胞増殖阻害濃度（IC50）：0.13～4.2μg/mL］が認められ、その他の植物も溶出画分には活性が認められた。
コンズランゴは、抽出エキスに活性が認められなかったが、粗分画したメタノール溶出画分に活性が認められたため、同画分をシリカゲル、ODSシリカゲルを充填したカラムクロマトグラフィーを繰り返し行うことにより、11種の化合物を単離した。NMRを中心とした機器スペクトルの解析と加水分解によりそれらの構造を4種の新規化合物を含む11種のプレグナン配糖体と決定した。単離された化合物の、HL-60細胞およびA549ヒト肺がん細胞に対する細胞毒性を評価した結果、いくつかの化合物に活性（IC50：3.7～22μM）が認められた。アグリコンの11位のアセチル基と12位のシンナモイル基の存在が活性の発現に重要であること、アグリコンの3位水酸基に結合する糖鎖の種類が活性の有無に関係すること、などの構造活性相関に関する知見が得られた。今後、活性を示した化合物の各種固形がん細胞に対する、アポトーシス誘導活性、細胞周期および微小管に対する解析を検討する。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
研究材料のメタノール抽出エキスと粗画分の調製とHL-60細胞を用いた細胞毒性スクリーニングを行うことができたが、その後の活性成分の同定に至っていないものが多い。さらに継続して化合物の分離精製を進める必要がある。
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| 今後の研究の推進方策 |
今後もさらに多くの研究材料について細胞毒性スクリーニングを行い、活性化合物を探索する。あわせて、単離された化合物の生物活性の評価をHL-60細胞およびA549ヒト肺がん細胞に対する細胞毒性にとどめず、HepG2ヒト肝がん細胞、MCF-7ヒト乳がん細胞など数種の固形がん細胞に対する活性を評価しがん細胞選択的な細胞毒性および各種がん細胞に対するアポトーシス誘導活性の評価、細胞周期および微小管に対する解析を検討する。
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