| 研究実績の概要 |
本研究は、マウスの精子のもととなる精巣幹細胞の維持や分化を制御する分子機構を解明することを目的としている。以前の研究において、我々は精巣幹細胞分化時にヒストン修飾をはじめとするエピジェネティックな因子が大きく変化することを免疫染色により明らかにした(エピジェネティック スイッチ)。本研究ではさらに精巣幹細胞分化時に重要な役割を有することが示唆されたヒストン修飾状態を全ゲノムレベルで同定するために、生殖幹細胞および前駆細胞を用いたChIP-seqを実施することを計画した。そのためには成体マウスの精巣より採取する少数の生殖細胞を用いて解析する必要があるため、まず少量スケールのChIP-seqの実験系の構築を検討した。その結果、セルソーターを用いて一度に採取できる生殖細胞数(約数万個)からH3K4me3, H3K27me3, H3K9me2等のヒストン修飾のChIP-seqが行える実験系を確立することができた。この実験系を用い、これまでに成体マウスより採取した生殖幹細胞、前駆細胞からの各種ヒストン修飾のChIP-seqを実施した。一方で同様の細胞におけるRNA-seqも実施したことで、ヒストン修飾の変化と遺伝子発現の状態の相関について解析を行っているところである。今後生殖幹細胞分化時に変化するヒストン修飾状態が遺伝子発現に及ぼす影響を同定することを中心に解析を進め、幹細胞分化との関連について明らかにしていく予定である。
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