| 研究課題/領域番号 |
26860325
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| 研究機関 | 京都大学 |
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研究代表者 |
瀬戸口 留可 京都大学, 医学(系)研究科(研究院), 准教授 (50415204)
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| 研究期間 (年度) |
2014-04-01 – 2016-03-31
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| キーワード | 免疫学的記憶 |
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| 研究実績の概要 |
メモリーCD8T細胞は外来抗原が生体内から除去された後でも免疫系に長期間生存し、高い生体防御能力を維持する。これまで、MHCクラスII（MHCII）欠損マウスを用いた実験からメモリーCD8T細胞の維持にCD4T細胞が重要であると考えられてきたが、我々は、CD4T細胞ではなく、MHCII分子の欠損自体がメモリーCD8T細胞の恒常性に影響を及ぼすことを見出した。さらに、MHCII欠損マウスに移入したメモリーT細胞は活性化したT細胞の特徴を示すことを見出し、MHCII欠損環境下ではT細胞が活性化しやすいため恒常性破綻をきたすという仮説をたてた。この仮説を検討するために以下の実験を行った。まず始めに、MHCII欠損マウスに移入したメモリーCD8T細胞の活性化状態の多角的定量化を試みた。BrdUとhoechst33342を組み合わせて詳細な細胞周期を解析し、Eomes/Tbet/STAT3の発現を解析したが、野生型マウスとMHCII欠損マウスに移入したCD8T細胞で大きな差異は観察されなかった。次にメモリーT細胞の恒常性破綻を引き起こすMHCII欠損抗原提示細胞の異常がMyd88依存的に誘導されているかを検討した。MHCIIとMyd88を欠損するマウスにおいてもMHCII欠損マウスと同様にメモリーT細胞の数が減少したことから、Myd88シグナル非依存的にMHCII欠損抗原提示細胞の異常が誘導されていることが明らかになった。次に、抗原提示細胞に発現するMHCクラスII分子の細胞外領域または細胞内領域どちらが、メモリーT細胞の恒常性を維持するのかを検討するために、細胞外領域または細胞内領域の一部を欠損させたMHCIIのベータ鎖のミュータント(mut)およびワイルド(wt)タイプを発現させるレトロウイルスベクターを作成した。現在、このベクターを用いて実験する用意を進めている段階である。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
申請書に記入し、まだ検討していない項目に関しては、平成27年度に検討可能な範囲である。
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| 今後の研究の推進方策 |
細胞外領域を欠損させた、または細胞内領域の一部を欠損させたMHCII分子のベータ鎖のミュータント(mut)およびワイルド(wt)タイプを発現させるレトロウイルスベクターを用いて、抗原提示細胞に発現するMHCクラスII分子の細胞外領域または細胞内領域どちらが、メモリーCD8T細胞の恒常性を維持しうるのかを検討する。MHCII欠損マウスに移入したメモリーT細胞で発現が亢進しているcyclinA2の発現を抑制することで、メモリーＴ細胞の恒常性が維持されるようになるか検討する。これらと並行して、野生型およびMHCII欠損マウスのマクロファージおよび樹状細胞とメモリーＴ細胞の共培養の実験系を用い、試験管内でのＴ細胞の活性化状態への影響を解析し、マウスの生体内で起きている現象を試験管内でも再現できるか検討する。試験管内でも再現可能だった場合、阻害剤を用いた網羅的解析により、メモリーＣＤ８Ｔ細胞の恒常性維持機構の解明を試みる。
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