B型肝炎ウイルス感染による肝線維化進展、発癌機序の解析

2016 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 26860491
• 研究機関: 千葉大学
• 研究代表者: 中本 晋吾 千葉大学, 大学院医学研究院, 助教 (90586596)
• 研究期間 (年度): 2014-04-01 – 2017-03-31
• キーワード: B型肝炎ウイルス / 肝線維化

研究実績の概要

B型肝炎ウイルス(HBV)は肝臓に持続感染して炎症やストレス、加齢、遺伝要因などが複雑に絡みながら慢性肝炎、肝硬変、肝癌へと進展する。本研究では主に細胞老化との関連に着目しウイルスの持続感染による肝病態発症の分子機序を解明することを目標として培養細胞系を用いた検討を行った。老化関連疾患への関与が指摘されている脱アセチル化酵素活性を有するサーチュイン遺伝子の発現抑制実験を行った。サーチュイン遺伝子が肝星細胞の活性化やサイトカイン産生、線維化関連遺伝子の発現レベルと関連していることが示唆された。HBV遺伝子およびタンパク発現実験の結果からHBVは肝星細胞の活性化に影響していると考えられた。染色体外性に環状DNAを自立複製することが可能な発現ベクターを用いた細胞老化の評価系を構築した。非組み込み状態におけるHBVタンパクの持続的な発現に対する細胞老化への影響について評価する上で有用な方法と考えられた。原核生物のもつRNA誘導型外来核酸分解機構であるCRISPR/Casに基づいたゲノム編集技術を用いてサーチュイン遺伝子ノックアウト細胞を作成した。RNAシークエンスの結果遺伝子ノックアウト細胞では野生型細胞と比較して特定の遺伝子セットに変動がみられ、遺伝子の機能を解明する上で重要な知見と考えられた。またサーチュインの欠損はHBV複製に影響していた。以上の検討結果からサーチュインはHBV関連肝疾患の病態に関与している可能性が示唆され、新規の治療的アプローチを考案する上で今後本検討の結果得られた知見の詳細な機序を解明していくことが必要と考えられた。

研究成果

• [雑誌論文] Discrepancy between Hepatitis C Virus Genotypes and NS4-Based Serotypes: Association with Their Subgenomic Sequences. (2017)
  • 著者名/発表者名: Win NN, Nakamoto S, Kanda T, Takahashi H, Takahashi-Nakaguchi A, Yasui S, Nakamura M, Wu S, Imazeki F, Mikami S, Yokosuka O, Gonoi T, Shirasawa H.
  • 雑誌名: Int J Mol Sci. 巻: 18 ページ: E172
  • DOI: 10.3390/ijms18010172.
  • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Cooperative effects of hepatitis B virus and TNF may play important roles in the activation of metabolic pathways through the activation of NF-κB. (2016)
  • 著者名/発表者名: Wu S, Kanda T, Nakamoto S, Jiang X, Nakamura M, Sasaki R, Haga Y, Shirasawa H, Yokosuka O.
  • 雑誌名: Int J Mol Med. 巻: 38 ページ: 475-81
  • DOI: 10.3892/ijmm.2016.2643
  • 査読あり / オープンアクセス
• [学会発表] B型肝炎ウイルスにおけるエピジェネティック転写制御機構の検討 (2016)
  • 著者名/発表者名: 中本晋吾、神田達郎、佐々木玲奈、呉霜、Nan Nwe Win、芳賀祐規、中村昌人、横須賀收、白澤浩
  • 学会等名: 第52回日本肝臓学会総会
  • 発表場所: 東京ベイ幕張ホール（千葉県千葉市）
  • 年月日: 2016-05-19 – 2016-05-19
• [学会発表] エピジェネティック修飾によるB型肝炎ウイルス増殖制御に関する検討 (2016)
  • 著者名/発表者名: 中本晋吾、神田達郎、横須賀收
  • 学会等名: 第102回日本消化器病学会総会
  • 発表場所: 京王プラザホテル（東京都新宿区）
  • 年月日: 2016-04-21 – 2016-04-21