| 研究課題/領域番号 |
26860505
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| 研究機関 | 鳥取大学 |
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研究代表者 |
坂部 友彦 鳥取大学, 医学部, 助教 (50639747)
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| 研究期間 (年度) |
2014-04-01 – 2017-03-31
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| キーワード | 癌幹細胞 |
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| 研究実績の概要 |
本研究では、肝癌幹細胞と肝幹細胞を比較することで、肝癌幹細胞に特徴的な遺伝子発現や代謝経路を明らかにすることで、肝癌幹細胞の発生メカニズム、幹細胞性維持機構を解明し、新規腫瘍制御技術を開発することを目的としている。
現在までに、マウスに0.1% DDC食を4週間与えることで肝障害を誘導することが可能であり、DDC食を与えたマウスではコントロール食を与えたマウスと比較して肝再生の指標とされる肝/体重比の増加が認められることが明かとなった。また、0.1% DDC食を5週間与えたマウス肝臓からコラゲナーゼ還流法を用いて非実質細胞を分取し、Flow cytometryによる解析を行った結果、EpCAM陽性肝幹細胞、CD44陽性肝幹細胞の割合はそれぞれ全体の0.1%であった。
さらに、癌細胞における予備的検討として、ヒト肝癌細胞株HuH7を用いたsphere formation assayを行った結果、CD44陽性細胞はCD44陰性細胞と比較してsphere形成能が有意に高いことが明かとなった。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
研究実績の概要で示した通り、肝幹細胞分取のために、肝障害マウスモデルを作成してEpCAM陽性、CD44陽性肝幹細胞の割合を検討した結果、その割合は0.1%と極めて少なく、解析に必要な細胞の回収に時間がかかっている。また、癌幹細胞分取の為の肝癌モデルマウスは現在DEN投与により作成中である。
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| 今後の研究の推進方策 |
今後の予定として、コラゲナーゼ還流法等における手技向上を行うことで、マウス肝障害モデル、肝発癌モデルから肝幹細胞、肝癌幹細胞を効率良く回収し、遺伝子発現、代謝経路を比較することで、癌幹細胞に特徴的な遺伝子発現、代謝経路を明らかにする。また、これらの解析をもとに、癌幹細胞における治療標的となる分子の探索も行う予定である。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
本年度は当初の想定よりも回収できた細胞が少ないために、遺伝子発現、代謝経路の網羅的な解析に必要な細胞数を十分に確保ができず、これらの解析が実施出来なかったために使用額が予定より下回った。
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| 次年度使用額の使用計画 |
今年度は、昨年度実施出来なかった遺伝子発現等の網羅的解析に予算を当てると共に、培地などの細胞培養用試薬及び器具、RNA干渉等の分子生物学的実験に使用する消耗品を物品費として使用する。
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