| 研究課題/領域番号 |
26860626
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| 研究機関 | 東京大学 |
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研究代表者 |
川上 貴久 東京大学, 医学部附属病院, 助教 (10722093)
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| 研究期間 (年度) |
2014-04-01 – 2016-03-31
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| キーワード | 慢性腎臓病新規治療 |
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| 研究実績の概要 |
TRPV4がin vivoで炎症促進・腎傷害増悪作用を有することの証明として，TRPV4ノックアウト(KO)マウスとコントロールとして同胞の野生型マウスを用い，片側尿管結紮モデル(UUO)と片側虚血再灌流モデル(uIRI)を作成した．UUOは術後2日，6日，10日で採材した．いずれも腎のqPCRでは，サイトカイン・ケモカインなどの炎症性メディエーターの発現に有意差は認められなかった．しかし，術後10日では，コラーゲンやa-SMAなどの線維化に関与する分子の発現がKOマウスで有意に低下していた．uIRIは術後2日，8日，14日で採材した．前2者では炎症性メディエーターの発現には有意差を認めなかったが，14日ではKOマウスで線維化が軽減していた．
上記と並行して，集合管細胞におけるTRPV4を介する炎症惹起の分子生物学的機序を解明すべく，マウス集合管培養細胞mIMCD-3を用いたin vitroの系で解析を行った．TRPV4を介して炎症性メディエーターを誘導する病態生理学的刺激を探索するため，まず細胞膜伸展刺激として低張液を用いたが，誘導されなかった．一方，DAMP（damage-associated molecule pattern）として凍結融解を繰り返してネクローシスに陥らせた細胞の抽出液で刺激したところ，炎症性メディエーターを誘導し，かつTRPV4の阻害薬であるRuthenium Redで有意かつ大幅に抑制されたので，DAMPがTRPV4を介する炎症惹起に関与している可能性が示唆された．
以上のことから，炎症を伴う線維化モデルにおいてTRPV4が線維化を促進すること，加えてDAMPがその刺激となっていることが明らかとなった．
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
応募書類の研究計画に記した平成26年度の内容については，概ね実施できており，in vivo，in vitroの探索とも仮説を裏付けるようなデータが得られているため．
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| 今後の研究の推進方策 |
in vivoの実験については，再現性をとるとともに，炎症という観点を中心により詳細な分析を進めていく予定である．in vitroの実験については，DAMPがTRPV4を介して炎症性メディエーターを誘導する機序について，そのシグナル伝達経路をより詳細に解析していく方針としている．またさらに，平成27年度の実験計画にあるように，TRPV4阻害薬のin vivoにおける炎症・腎傷害改善効果の証明へと推進していく予定である．
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