糖尿病性腎症の新規バイオマーカー、メガリンの尿中逸脱機序の検討

2016 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 26860630
• 研究機関: 新潟大学
• 研究代表者: 細島 康宏 新潟大学, 医歯学総合研究科, 特任准教授 (50464003)
• 研究期間 (年度): 2014-04-01 – 2017-03-31
• キーワード: 糖尿病性腎症 / バイオマーカー / メガリン / 近位尿細管 / エクソソーム

研究実績の概要

糖尿病性腎症の早期診断と予後予測においては尿中アルブミンの測定が重要であるが、様々な問題点も指摘されており、新しいバイオマーカーの開発が求められている。メガリンは近位尿細管腔側に高発現し、多種の糸球体濾過蛋白質の再吸収・代謝と細胞内シグナル伝達に関わるエンドサイトーシス受容体である。これまでに研究代表者は、ヒト尿中メガリンELISA測定系を開発するとともに、メガリンの尿中排泄量の測定が、糖尿病性腎症患者の重症度や病態評価に有用であり、既存のバイオマーカーとは異なる新しいマーカーになり得る可能性を報告してきた。
しかし、メガリンの尿中への排泄機序についての詳細は未だに不明である。一方で、全長型メガリンの尿中排泄はエクソサイトーシスに関連することが示唆されるため、その機序について検討を行った。
糖尿病性腎症患者の尿から分離した尿エクソソームをナノ粒子解析システム（ナノサイト）にて解析したところ、健常者の尿に比較して総数が増加していた。さらに、ウエスタンブロットによる解析により、健常者に比較して、糖尿病性腎症患者の尿中エクソソームはメガリン含有量が多く、したがってその多くが近位尿細管由来であることが分かった。また、培養近位尿細管細胞において、終末糖化産物（AGE）化アルブミンの取り込みにより、メガリン含有エクソソームの排泄が増加した。
以上より、近位尿細管由来エクソソームの尿中排泄動態は糖尿病性腎症の発症および進展機序に関係しており、尿中全長型メガリンはそれを示すバイオマーカーとして有用であり、その解析を継続することは有意義であると考えられた。

研究成果

• [雑誌論文] Exocytosis-Mediated Urinary Full-Length Megalin Excretion Is Linked With the Pathogenesis of Diabetic Nephropathy (2017)
  • 著者名/発表者名: Shankhajit De, Shoji Kuwahara, Michihiro Hosojima, Tomomi Ishikawa, Ryohei Kaseda, Piyali Sarkar, Yusuke Yoshioka, Hideyuki Kabasawa, Tomomichi Iida, Sawako Goto, Koji Toba, Yuki Higuchi, Yoshiki Suzuki, Masanori Hara, Hiroyuki Kurosawa, Ichiei Narita, Yoshiaki Hirayama, Takahiro Ochiya, Akihiko Saito
  • 雑誌名: Diabetes 巻: May; 66(5) ページ: 1391-1404
  • DOI: 10.2337/db16-1031
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [学会発表] Mechanisms underlying urinary excretion of full-length and extracellular domain forms of megalin (2016)
  • 著者名/発表者名: Shankhajit De，Shoji Kuwahara，Michihiro Hosojima，Tomomi Ishikawa，Ryohei Kaseda，Yusuke Yoshioka，Yoshiki Suzuki，Ichiei Narita，Takahiro Ochiya，Hiroyuki Kurosawa, Yoshiaki Hirayama, Akihiko Saito
  • 学会等名: 第59回日本腎臓学会学術総会
  • 発表場所: パシフィコ横浜(神奈川県横浜市)
  • 年月日: 2016-06-17 – 2016-06-19