2016 年度実績報告書

新規人工染色体ベクターを用いた血友病に対する再生補充療法の開発

研究課題

研究課題/領域番号	26860733
研究機関	鳥取大学
研究代表者	黒崎創鳥取大学, 医学(系)研究科(研究院), 助教 (70464295)
研究期間 (年度)	2014-04-01 – 2017-03-31
キーワード	血友病 / 人工染色体ベクター / iPS細胞
研究実績の概要	血友病モデルマウスよりiPS細胞を作製し、FVIII遺伝子搭載人工色体ベクターをiPS細胞に導入し肝芽細胞・血管内皮前駆細胞へ分化誘導する。作製できた細胞を移植しその治療効果を検証する。血友病モデルマウス由来線維芽細胞からのiPS細胞作製については、微小核細胞融合法による初期化遺伝子搭載ベクター移入によりクローンを取得し、未分化マーカーの良好な発現が認められている。またCHO細胞中で構築していた、治療遺伝子であるFVIIIを搭載させたベクターを導入し、ドナーであるCHO細胞同様のFVIII発現量とES細胞同等の未分化マーカーの発現が観察された。またこの治療細胞がよりES様であることを確認するためにキメラマウス作製の追加実験を行い、様々なキメラマウス産仔を得た。得られたキメラマウスにおける解析、血漿中のFVIII測定によりその活性は正常マウスのそれに比べ同等かそれ以上の活性を示した。