| 研究実績の概要 |
早産児脳性麻痺の原因となる脳室周囲白質軟化症（PWMI）では低酸素虚血により脳内のオリゴデンドロサイト(OLG)が特異的に傷害される。本研究は、低酸素虚血後に脳内でOLGの成熟と髄鞘化を阻害している因子を同定し、メカニズム解析を行うことを目的とする。また、得られた結果を幹細胞を用いた細胞補充療法へ還元させることを目指す。本年度は、1)PWMIモデル動物脳内で神経細胞の障害解析、２）OLG分化抑制に関与する可能性のある因子の選定３）in vitroでの低酸素実験を行った。
PWMIモデル動物の脳内で、神経細胞のアポトーシスをa-caspase-3免疫染色により確認した。結果、a-caspase-3陽性細胞は確認できず神経細胞死は見られなかった。また、大脳皮質の投射ニューロン数をSATBII, ctip2免疫染色、抑制性ニューロンをサブタイプマーカーの免疫染色により確認したところ傷害側、反対側の大脳皮質で数に変化は見られなかった。さらに後肢支配の皮質脊髄路に逆行性トレーサーFluoroGold(FG)を注入し、大脳皮質でのFG陽性細胞数を測定した。結果、両側皮質間での差は見られなかった。これらよりOLG特異的に傷害が起きていることが明らかになった。OLG移植による機能回復を目指すのに適切なモデルであることが示唆される。
OLGの分化・成熟に影響を与える因子の特定を目的として、低酸素虚血後の大脳皮質と白質において網羅的遺伝子解析を行っていた。遺伝子発現の上昇が見られた因子のうち、PWMIモデル脳で遺伝子発現が変化しているものをreal-time PCRにより確認し候補因子(IGF,Kir)を選定した。またOLGにおける低酸素虚血の影響と候補因子の作用を調べるためにin vitroでの実験を行った。これらより傷害脳でのOLGの分化と細胞生存の促進につなげていけると考えられる。
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