皮膚のメラニン合成、分解系におけるオートファジーの役割の解明

2015 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 26860881
• 研究機関: 大阪大学
• 研究代表者: 楊 伶俐 大阪大学, 医学(系)研究科(研究院), 特任研究員 (40711784)
• 研究期間 (年度): 2014-04-01 – 2016-03-31
• キーワード: オートファジー / 色素産生 / メラノサイト

研究実績の概要

1）ヒト表皮正常メラノサイト(NHEM)を用いて、オートファジー関連因子をRNA干渉法よりノックダウンし、LC3IIとp62を細胞蛍光染色し、共焦点レーザー顕微鏡による発現を確認する、ウエスタンブロット、更に電子顕微鏡によるオートファゴゾームの形成を観察して確認した。同時に、メラニン産生関連遺伝子の発現パターン、メラノソーム合成の低下が観察された、これらの結果より、オートファジー機構がメラノサイトのメラノソーム形成、成熟に関与していると考えられる。
2）ヒト表皮正常ケラチノサイト(NHEK)を用いて、培養メラノサイトから抽出、精製したメラノソームを貪食したNHEKにオートファジー関連因子をRNA干渉法よりノックダウンし、同様にオートファジー関連遺伝子発現、オートファゴゾーム形成の変動を検討した。更に、NHEK細胞内メラニン含有量の変化も定性的に測定した。In vitro実験系でケラチノサイト内で、リソソーム関連オートファゴゾームがメラノソームの分解に寄与することが証明され、ケラチノサイトでのオートファジーがメラノソームの分解に関与していると考えられる。
3）NHEMと NHEKの共培養モデルを確立した、オートファジー抑制剤、促進剤の投与で、メラニン産生量、細胞間メラノソーム転送機構への影響を検討した結果、明らかな影響はみられませんでした。

研究成果

• [雑誌論文] 白斑の新しい病因論 (2016)
  • 著者名/発表者名: 楊 伶俐、 金田 真理、種村 篤、片山 一朗
  • 雑誌名: MB Derma (デルマ) 巻: 18 ページ: 239
  • オープンアクセス
• [雑誌論文] Clinical and Histologic Analysis of the Efficacy of Topical Rapamycin Therapy Against Hypomelanotic Macules in Tuberous Sclerosis Complex. (2015)
  • 著者名/発表者名: Wataya-Kaneda M, Tanaka M, Yang L, Yang F, Tsuruta D, Nakamura A, Matsumoto S, Hamasaki T, Tanemura A, Katayama I.
  • 雑誌名: JAMA Dermatol. 巻: 151(7) ページ: 722-30
  • DOI: 10.1001/jamadermatol.2014.4298.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] 4-(4-hydroroxyphenyl)-2-butanol (rhododendrol) activates the autophagy-lysosome pathway in melanocytes: insights into the mechanisms of rhododendrol-induced leukoderma. (2015)
  • 著者名/発表者名: Yang L, Yang F, Wataya-Kaneda M, Tanemura A, Tsuruta D, Katayama I.
  • 雑誌名: J Dermatol Sci. 巻: 77(3) ページ: 182-5
  • DOI: 10.1016/j.jdermsci.2015.01.006.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] An immune pathological and ultrastructural skin analysis for rhododenol-induced leukoderma patients. (2015)
  • 著者名/発表者名: Tanemura A, Yang L, Yang F, Nagata Y, Wataya-Kaneda M, Fukai K, Tsuruta D, Ohe R, Yamakawa M, Suzuki T, Katayama I.
  • 雑誌名: J Dermatol Sci. 巻: 77(3) ページ: 185-8
  • DOI: 10.1016/j.jdermsci.2015.01.002
  • 査読あり / オープンアクセス
• [学会発表] Silencing of tuberous sclerosis complex (TSC) 2 via siRNA causes reduction of autophagy and impairment of melanogenesis in cultured human skin epidermal melanocytes: implication for a potential mechanism of hypopigmented macules in tuberous sclerosis complex. (2015)
  • 著者名/発表者名: Yang L, Wataya-Kaneda M, Tanaka M, Yang F, Tanemura A, Tateishi C, Tsuruta D, Ishii M, Katayama I.
  • 学会等名: 2015 World Congress of Dermatology
  • 発表場所: Vancouver, Canada
  • 年月日: 2015-06-08 – 2015-06-13
  • 国際学会