統合失調症患者由来iN細胞を用いたマイクロエンドフェノタイプの同定と病態解明

2015 年度 実施状況報告書

• 研究課題/領域番号: 26860932
• 研究機関: 九州大学
• 研究代表者: 佐方 功明 九州大学, 医学(系)研究科(研究院), 研究員 (00632308)
• 研究期間 (年度): 2014-04-01 – 2017-03-31
• キーワード: 統合失調症 / iN細胞

研究実績の概要

健常者4名の皮膚繊維芽細胞 (GM03440, GM05399, GM05565, GM07522：すべてCoriell Instituteより購入) 及び統合失調症罹患者4名の皮膚繊維芽細胞 (GM01792, GM01835, GM02497, GM02503)にそれぞれBAM因子 (BRN2, ASCL1, MYT1L) を強制発現させ、昨年度改良・報告した方法で健常者・罹患者両群のiN(誘導神経)細胞を誘導・培養した。細胞形態の神経細胞様変化やニューロンマーカーであるMAP2の増加、繊維芽細胞マーカーS100A4の減少が確実に再現される誘導後14日において健常者・罹患者両群のiN細胞のmRNAを回収し、リアルタイムPCR (LightCycler 480 real-time PCR system, Roche) によってmRNA発現レベルを比較した。その結果、統合失調症罹患者由来のiN細胞特異的にmRNA発現レベルが健常者の約2倍に増加している遺伝子を発見した。

現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

統合失調症罹患者の生きた神経細胞において健常者と有意に異なる発現を示す遺伝子の一つを明らかにし、本研究の目的である統合失調症のマイクロエンドフェノタイプの同定を一つ達成した。

今後の研究の推進方策

今回明らかにした統合失調症マイクロエンドフェノタイプの一つ (遺伝子XのmRNA発現量倍加) のタンパク質レベルでの検討とその下流に及ぶ影響を評価したい。

次年度使用額が生じた理由

他の財源による類似の研究と本研究を並行して行った解析(real-time PCR)があり、それらに必要な消耗品費用(RNA抽出キット・cDNA合成キット・PCR関連試薬等)を浮かせることが出来た。

次年度使用額の使用計画

本研究独自に必要な解析であり、申請時の計画にはなかったTali(イメージベースドサイトメーター)を利用したタンパク質発現量解析に使用したい。