口腔扁平上皮癌におけるDNp53の予後マーカーとしての応用

2016 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 26861696
• 研究機関: 北海道大学
• 研究代表者: 吉川 和人 北海道大学, 大学病院, 助教 (00637267)
• 研究期間 (年度): 2014-04-01 – 2017-03-31
• キーワード: p53 / 口腔がん / 浸潤 / 転移 / 優性阻害性変異 / バイオマーカー / 個別化医療

研究実績の概要

ヒト口腔扁平上皮癌細胞株5系（SAS、Ca9-22、HSC-2、HSC-3、HSC-4）のTP53遺伝子の変異を酵母p53機能アッセイで同定した。その結果、SASはE336X（recessive）、Ca9-22はR248W（DN）、HSC-2は225 5b ins（recessive）、HSC-3は360 4b ins（recessive）およびHSC-4はR248Q（DN）の変異を有していることがわかった。
変異TP53遺伝子産物の機能を解析するために、TP53に点突然変異とLOHを有するヒト口腔扁平上皮癌細胞株Ca9-22（R248W/-）とHSC-4（R248Q/-）の変異TP53遺伝子の発現阻害CRISPR/Cas9システムを利用して試みてきた。しかしながら、変異TP53遺伝子の発現を完全に抑制できた細胞株を得ることはできなかった。ゲノム編集効率と細胞選別法にさらなる改良が必要であることが示唆された。
前年度に行った変異TP53248W強制発現細胞とR248Q強制発現細胞株間で比較検討したcDNAアレイおよびmiRNAアレイ解析の結果から、両者間にはfocal adhesionが介在するシグナル伝達経路に何らかの違いがあることが示唆された。したがって、本年度の研究では、focal adhesion kinaseのリン酸化状態等を解析したが、明確な差異を見出すには至らなかった。