マクロファージとの異種細胞間相互作用を介した食道扁平上皮癌の発癌初期段階の解明

2015 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 26870364
• 研究機関: 神戸大学
• 研究代表者: 狛 雄一朗 神戸大学, 医学(系)研究科(研究院), 講師 (40714647)
• 研究期間 (年度): 2014-04-01 – 2016-03-31
• キーワード: 腫瘍関連マクロファージ / 食道扁平上皮癌 / 食道上皮内腫瘍 / p38 MAPキナーゼ / インターロイキン6

研究実績の概要

前年度はヒト食道正常扁平上皮細胞株とマクロファージ様細胞株を用いた間接共培養系を確立した。この系の解析によって間接共培養後のヒト食道正常扁平上皮細胞株ではp38 MAPキナーゼの活性化を介して増殖能・運動能が亢進している事を見出した。
平成27年度はヒト食道正常扁平上皮細胞株とマクロファージ様細胞株との間の異種細胞間相互作用を媒介する分子を見出す目的で、それぞれの単独培養あるいは間接共培養の培養上清を回収し、western blot-based cytokine arrayに供した。その結果、間接共培養上清では単独培養上清と比べてインターロイキン6（IL-6）のシグナルが増強していた。同じ培養上清を用いてIL-6のELISAを行うと、確かに間接共培養上清中ではIL-6の分泌が亢進している事が分かった。次に、IL-6の主な産生源を検討するため、ヒト食道正常扁平上皮細胞株とマクロファージ様細胞株それぞれの単独培養と間接共培養後のmRNAを抽出し、定量的RT-PCRを施行したところ、ヒト食道正常扁平上皮細胞株において間接共培養後にIL-6 mRNAの発現が著明に増加しており、間接共培養上清中のIL-6の主な産生源はヒト食道正常扁平上皮細胞株である事が分かった。さらには、間接共培養系にIL-6に対する中和抗体を添加すると、間接共培養によるヒト食道正常扁平上皮細胞株の増殖能亢進は有意に抑制された。最後に、食道上皮内腫瘍症例を用いてIL-6の免疫組織化学を施行したところ、前年度に明らかにしたリン酸化p38 MAPキナーゼに加えてIL-6も腫瘍細胞の一部に陽性所見が認められた。

研究成果

• [雑誌論文] Software-assisted morphometric and phenotype analyses of human peripheral blood monocyte-derived macrophages induced by a microenvironment model of human esophageal squamous cell carcinoma. (2016)
  • 著者名/発表者名: Nishio M, Urakawa N, Shigeoka M, Takase N, Ichihara Y, Arai N, Koma Y, Yokozaki H.
  • 雑誌名: Pathology International 巻: 66 ページ: 83-93
  • DOI: DOI: 10.1111/pin.12381
  • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] 消化管がんの進展とがん間質 (2016)
  • 著者名/発表者名: 横崎 宏、狛 雄一朗、重岡 學、西尾 真理
  • 雑誌名: 別冊Bio Clinica 慢性炎症とがん 巻: 5 ページ: 77-81
  • 査読あり
• [学会発表] Infiltrating macrophages may promote early esophageal carcinogenesis via p38 MAP kinase and IL-6 signaling (2016)
  • 著者名/発表者名: Yu-ichiro Koma, Nobuhisa Takase, Noriaki Arai, Himiko Kodaira, Masayoshi Hosono, Yumi Ichihara, Mari Nishio, Manabu Shigeoka, Hiroshi Yokozaki
  • 学会等名: Tenth AACR-JCA Joint Conference
  • 発表場所: Hyatt Regency Maui (アメリカ合衆国ハワイ・マウイ島)
  • 年月日: 2016-02-18
  • 国際学会
• [学会発表] NCAMとFGFRの相互作用はヒト食道扁平上皮癌における腫瘍関連マクロファージの生存能および遊走能に関与する (2015)
  • 著者名/発表者名: 高瀬 信尚、狛 雄一朗、荒井 慎明、小平 日実子、細野 雅義、市原 有美、西尾 真理、重岡 學、掛地 吉弘、横崎 宏
  • 学会等名: 第26回日本消化器癌発生学会
  • 発表場所: 米子全日空ホテル（鳥取県米子市）
  • 年月日: 2015-11-19
• [学会発表] NCAM is contributed to cell survival and migration of TAMs in human esophageal squamous cell carcinoma (2015)
  • 著者名/発表者名: 高瀬 信尚、狛 雄一朗、荒井 慎明、小平 日実子、細野 雅義、市原 有美、西尾 真理、重岡 學、横崎 宏
  • 学会等名: 第74回日本癌学会学術集会
  • 発表場所: 名古屋国際会議場（愛知県名古屋市）
  • 年月日: 2015-10-08
• [学会発表] Infiltrating macrophages may promote early esophageal carcinogenesis via p38 MAP kinase and IL-6 signaling (2015)
  • 著者名/発表者名: 狛 雄一朗、高瀬 信尚、荒井 慎明、小平 日実子、細野 雅義、市原 有美、西尾 真理、重岡 學、横崎 宏
  • 学会等名: 第74回日本癌学会学術集会
  • 発表場所: 名古屋国際会議場（愛知県名古屋市）
  • 年月日: 2015-10-08
• [学会発表] Role of Cyr61 in esophageal squamous cell carcinoma microenvironment (2015)
  • 著者名/発表者名: 重岡 學、狛 雄一朗、西尾 真理、高瀬 信尚、市原 有美、細野 雅義、小平 日実子、荒井 慎明、横崎 宏
  • 学会等名: 第74回日本癌学会学術集会
  • 発表場所: 名古屋国際会議場（愛知県名古屋市）
  • 年月日: 2015-10-08
• [学会発表] GDF15 from both tumor-associated macrophages and cancer cells contributes to the progression of esophageal carcinoma (2015)
  • 著者名/発表者名: 市原 有美、細野 雅義、小平 日実子、高瀬 信尚、西尾 真理、荒井 慎明、重岡 學、裏川 直樹、狛 雄一朗、横崎 宏
  • 学会等名: 第74回日本癌学会学術集会
  • 発表場所: 名古屋国際会議場（愛知県名古屋市）
  • 年月日: 2015-10-08
• [学会発表] CCL3 derived from TAMs promotes migration of ESCC cell line via Akt and ERK signaling (2015)
  • 著者名/発表者名: 荒井 慎明、狛 雄一朗、小平 日実子、細野 雅義、市原 有美、高瀬 信尚、西尾 真理、重岡 學、横崎 宏
  • 学会等名: 第74回日本癌学会学術集会
  • 発表場所: 名古屋国際会議場（愛知県名古屋市）
  • 年月日: 2015-10-08
• [学会発表] TAM-like morphological changes of human Mφs are reflected to nuclear and cytoplasmic area, aspect ratio and N:C ratio (2015)
  • 著者名/発表者名: 西尾 真理、裏川 直樹、重岡 學、高瀬 信尚、市原 有美、荒井 慎明、小平 日実子、細野 雅義、狛 雄一朗、横崎 宏
  • 学会等名: 第74回日本癌学会学術集会
  • 発表場所: 名古屋国際会議場（愛知県名古屋市）
  • 年月日: 2015-10-08
• [学会発表] ヒト単球由来マクロファージのTAM様形態変化は核および細胞質の面積、長径、短径、細胞質縦横比の増加と核胞体比の減少に反映される (2015)
  • 著者名/発表者名: 西尾 真理、裏川 直樹、重岡 學、高瀬 信尚、市原 有美、荒井 慎明、小平 日実子、細野 雅義、狛 雄一朗、横崎 宏
  • 学会等名: 第35回日本分子腫瘍マーカー研究会
  • 発表場所: 名古屋国際会議場（愛知県名古屋市）
  • 年月日: 2015-10-07
• [学会発表] マクロファージによるp38 MAPキナーゼおよびIL-6の活性化は食道癌の発癌初期段階を促進する (2015)
  • 著者名/発表者名: 狛 雄一朗、高瀬 信尚、荒井 慎明、小平 日実子、細野 雅義、市原 有美、西尾 真理、重岡 學、横崎 宏
  • 学会等名: 第34回分子病理学研究会 神戸シンポジウム
  • 発表場所: 神戸ホテル フルーツ・フラワー（兵庫県神戸市）
  • 年月日: 2015-07-25
• [学会発表] NCAMはヒト食道扁平上皮癌における腫瘍関連マクロファージの生存能および浸潤能に関与する (2015)
  • 著者名/発表者名: 高瀬 信尚、狛 雄一朗、荒井 慎明、小平 日実子、細野 雅義、市原 有美、西尾 真理、重岡 學、横崎 宏
  • 学会等名: 第12回日本病理学会カンファレンス
  • 発表場所: 六甲山ホテル（兵庫県神戸市）
  • 年月日: 2015-07-24
• [学会発表] ヒト単球由来マクロファージのTAM様形態変化は細胞質縦横比のみならず核面積と核胞体面積比にも反映される (2015)
  • 著者名/発表者名: 西尾 真理、荒井 慎明、宇都宮 壮顕、市原 有美、高瀬 信尚、裏川 直樹、重岡 學、狛 雄一朗、横崎 宏
  • 学会等名: 第104回日本病理学会総会
  • 発表場所: 名古屋国際会議場（愛知県名古屋市）
  • 年月日: 2015-05-02
• [学会発表] 癌微小環境中のGDF15は食道扁平上皮癌の増殖・浸潤を促進する (2015)
  • 著者名/発表者名: 狛 雄一朗、裏川 直樹、宇都宮 壮顕、荒井 慎明、市原 有美、高瀬 信尚、西尾 真理、重岡 學、横崎 宏
  • 学会等名: 第104回日本病理学会総会
  • 発表場所: 名古屋国際会議場（愛知県名古屋市）
  • 年月日: 2015-05-02
• [学会発表] 腫瘍関連マクロファージから分泌されるIL-24によるヒト食道扁平上皮癌の進展機構の解明 (2015)
  • 著者名/発表者名: 秋山 寛明、市原 有美、荒井 慎明、宇都宮 壮顕、高瀬 信尚、西尾 真理、裏川 直樹、重岡 學、狛 雄一朗、横崎 宏
  • 学会等名: 第104回日本病理学会総会
  • 発表場所: 名古屋国際会議場（愛知県名古屋市）
  • 年月日: 2015-05-02
• [学会発表] マクロファージによるp38 MAPキナーゼの活性化は食道癌の発癌初期段階を促進する (2015)
  • 著者名/発表者名: 狛 雄一朗、高瀬 信尚、荒井 慎明、宇都宮 壮顕、市原 有美、西尾 真理、裏川 直樹、重岡 學、横崎 宏
  • 学会等名: 第104回日本病理学会総会
  • 発表場所: 名古屋国際会議場（愛知県名古屋市）
  • 年月日: 2015-05-01
• [学会発表] NCAMはヒト食道癌における腫瘍関連マクロファージの生存能および浸潤能に関与する (2015)
  • 著者名/発表者名: 高瀬 信尚、狛 雄一朗、荒井 慎明、宇都宮 壮顕、市原 有美、西尾 真理、裏川 直樹、重岡 學、横崎 宏
  • 学会等名: 第104回日本病理学会総会
  • 発表場所: 名古屋国際会議場（愛知県名古屋市）
  • 年月日: 2015-05-01
• [学会発表] 食道上皮内マクロファージ密度と上皮増殖性病変分布の相関 (2015)
  • 著者名/発表者名: 横崎 宏、狛 雄一朗、西尾 真理、重岡 學、裏川 直樹、高瀬 信尚、宇都宮 壮顕、市原 有美、荒井 慎明
  • 学会等名: 第104回日本病理学会総会
  • 発表場所: 名古屋国際会議場（愛知県名古屋市）
  • 年月日: 2015-05-01
• [学会発表] 神経芽腫の進展における腫瘍関連炎症細胞と腫瘍関連間質細胞の相互作用の解明 (2015)
  • 著者名/発表者名: 橋本 興人、吉田 牧子、狛 雄一朗、矢内 友子、長谷川 大一郎、小坂 嘉之、西村 範行、横崎 宏
  • 学会等名: 第104回日本病理学会総会
  • 発表場所: 名古屋国際会議場（愛知県名古屋市）
  • 年月日: 2015-04-30
• [学会発表] 食道扁平上皮癌の増殖、進展と腫瘍組織内CD204陽性マクロファージの関連 (2015)
  • 著者名/発表者名: 横崎 宏、重岡 學、裏川 直樹、西尾 真理、高瀬 信尚、宇都宮 壮顕、市原 有美、荒井 慎明、狛 雄一朗
  • 学会等名: 第104回日本病理学会総会
  • 発表場所: 名古屋国際会議場（愛知県名古屋市）
  • 年月日: 2015-04-30
• [学会発表] 食道扁平上皮癌微小環境においてCyr61はマクロファージのCD204発現誘導および遊走能を亢進する (2015)
  • 著者名/発表者名: 横崎 宏、重岡 學、市原 有美、裏川 直樹、西尾 真理、高瀬 信尚、宇都宮 壮顕、荒井 慎明、秋山 寛明、狛 雄一朗
  • 学会等名: 第104回日本病理学会総会
  • 発表場所: 名古屋国際会議場（愛知県名古屋市）
  • 年月日: 2015-04-30
• [学会発表] マクロファージによるCCL3-CCR1経路の活性化はヒト食道扁平上皮癌の運動能を亢進させる (2015)
  • 著者名/発表者名: 荒井 慎明、宇都宮 壮顕、市原 有美、高瀬 信尚、西尾 真理、裏川 直樹、重岡 學、狛 雄一朗、横崎 宏
  • 学会等名: 第104回日本病理学会総会
  • 発表場所: 名古屋国際会議場（愛知県名古屋市）
  • 年月日: 2015-04-30