| 研究課題/領域番号 |
26870613
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| 研究機関 | 東京薬科大学 |
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研究代表者 |
片桐 文彦 東京薬科大学, 薬学部, 助教 (60420642)
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| 研究期間 (年度) |
2014-04-01 – 2017-03-31
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| キーワード | ペプチド / 受容体 / 線維芽細胞 / 接着 / 遊走 |
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| 研究実績の概要 |
受容体に特異的に結合する分子プローブの開発は、受容体の機能解析に留まらず、疾患の原因解明や創薬に直結する。インテグリンやシンデカンなどサブタイプが多く存在する受容体に特異的に結合する分子プローブの開発には、低分子化合物ライブラリーを用いたスクリーニングが効率的であると考えられる。本研究課題では、申請者らが所有する基底膜タンパク質ラミニンのアミノ酸配列を網羅するラミニンペプチドライブラリーのスクリーニングによって見出された機能性ペプチドをケミカルバイオロジーの手法を取り入れて、ラミニンの受容体結合部位の同定を行うとともに、受容体特異的な分子プローブの開発を目指す。
申請者らは現在までに、全11種類のラミニンサブユニット全てのアミノ酸配列を網羅する合成ペプチドライブラリーの作成を完了している。また、現在までに、複数のインテグリン結合、2種のジストログリカン結合ペプチド、多数のシンデカン結合ペプチドを見出している。
今年度はこのラミニンペプチドライブラリーのヒト皮膚線維芽細胞（HDF）を用いた細胞接着スクリーニングを完了させ、ヘパリン/EDTAによる接着様式の推定、抗インテグリン抗体を用いた受容体同定を終了した。また、昨年度よりHDFを用いた細胞遊走スクリーニングをラミニンγ鎖配列由来ライブラリーから開始し、継続中である。一方、申請者らが既に見出している機能性ペプチドより、C16ペプチド、A2G10ペプチド（インテグリンα6β1結合ペプチド）、A2G80ペプチド（αジストログリカン結合ペプチド）のAla置換ペプチドを利用して構造活性相関研究を行い、一部を学会にて発表した。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
当初の予定より少し遅れたが、細胞接着スクリーニングは完了した。細胞遊走活性のスクリーニングは予定通りに開始したが、一部、条件検討に時間を費やし、来年度も継続して実施する。また、既知の機能性ペプチドの構造活性相関研究にも並行して着手している。いずれも一定の結果は得られており、来年度さらなる展開を予定している。
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| 今後の研究の推進方策 |
細胞遊走スクリーニングを継続して行い、完了させる。また、既知の機能性ペプチドの構造活性相関研究をさらに展開する。受容体が特定されているA2G10、A2G80ペプチドは医薬分野への応用も検討し始めており、さらに発展させる予定である。受容体が特定されていないC16ペプチドは光親和性標識を導入して受容体の同定を試みる。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
細胞遊走活性評価の条件検討に若干時間を要し、必要消耗品が少なかったため。また、光親和性標識の導入を来年度に見送ったため。
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| 次年度使用額の使用計画 |
次年度に繰り越した実験を実施するため、試薬購入代に充てる。
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