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2015 年度 実績報告書

シイタケとブナシメジ由来プロテアーゼの遺伝子解析

研究課題

研究課題/領域番号 26870730
研究機関近畿大学

研究代表者

福田 泰久  近畿大学, 農学部, 講師 (80609602)

研究期間 (年度) 2014-04-01 – 2016-03-31
キーワードプロテアーゼ / きのこ / 子実体形成 / Lentinula edodes / Hypsizygus marmoreus
研究実績の概要

きのこ類微生物の最大の特徴は、子実体形成という形態的変化であるが、生化学的なメカニズムは未解明である。当研究室では、各種プロテアーゼ阻害剤を用いた実験により、プロテアーゼ群の活性化と不活化が子実体形成に深くかかわり、形態変化の制御因子として働いていることを報告してきた。
しかしながら、それらの1次構造は不明であり、N末端アミノ酸配列からの1次構造予測が困難であった。そこで、2011年にForestGENde公開されたシイタケゲノムデータベースより、プロテアーゼとしてアノテーションされている遺伝子を、16種(Eqolisin様遺伝子4種,Pepsin様遺伝子7種,Metallo protease様遺伝子5種)抽出した。プロテアーゼ遺伝子群の発現量を解析したところ,栄養生長菌糸期ではg866遺伝子(Pepsin-A like protein)が顕著に発現していた。また,子実体原基形成期ではg10056遺伝子(Eukaryotic aspartic protease),g584, g1220(peptidase family M28), g4055(peptidase family M13)の発現量が増加し、菌糸期に顕著に発現量が確認されたg866遺伝子は減少していた。上記の4遺伝子(g10056、g584、g1220、g4055)がシイタケ子実体形成に関わることが示唆された。
また、ブナシメジの子実体形成に関わるメタロプロテアーゼに関しては、ブナシメジ菌床よりメタロプロテアーゼを精製し、そのN末端配列および内部配列を決定した。これらの情報をもとに遺伝子クローニングを行い、Fungalysin metallopeptidase (M36)に属することを解明した。

  • 研究成果

    (5件)

すべて 2016 2015

すべて 学会発表 (5件) (うち国際学会 1件)

  • [学会発表] Enzymatic characterization and gene expression analysis of proteases from Lentinula edodes2016

    • 著者名/発表者名
      Y. Fukuta, N. Shirasaka
    • 学会等名
      International Society for Mushroom Science
    • 発表場所
      Muziekgebouw aan het IJ (BR, Amsterdam, Netherlands)
    • 年月日
      2016-05-29 – 2016-06-02
  • [学会発表] シイタケ培養菌体内プロテアーゼ遺伝子群の発現解析2016

    • 著者名/発表者名
      福田泰久、白坂憲章
    • 学会等名
      日本農芸化学会2016年度大会
    • 発表場所
      札幌コンベンションセンター(北海道札幌市)
    • 年月日
      2016-03-27 – 2016-03-30
  • [学会発表] Characterization and gene cloning of proteases from Lentinula edodes2015

    • 著者名/発表者名
      Y. Fukuta, T. Iwanaga, T. Terashita, N. Shirasaka
    • 学会等名
      2015 International Chemical Congress of Pacific Basin Societies
    • 発表場所
      Sheraton Waikiki (Honolulu, Hawaii, USA)
    • 年月日
      2015-12-15 – 2015-12-20
    • 国際学会
  • [学会発表] Lentinula edodes(シイタケ)培養菌体内プロテアーゼ遺伝子群の発現解析2015

    • 著者名/発表者名
      福田泰久、寺下隆夫、白坂憲章
    • 学会等名
      第15回糸状菌分子生物学コンファレンス
    • 発表場所
      ルミエール府中(東京都府中市府中町)
    • 年月日
      2015-11-19 – 2015-11-20
  • [学会発表] Lentinula edodes由来菌体外プロテアーゼの遺伝子クローニング2015

    • 著者名/発表者名
      福田泰久、松下朋加、寺下隆夫、白坂憲章
    • 学会等名
      日本菌学会第59回大会
    • 発表場所
      那覇市ぶんかテンブス館(沖縄県那覇市牧志)
    • 年月日
      2015-05-15 – 2015-05-18

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公開日: 2017-01-06  

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