研究課題
本研究の目的は、Mastermind-like domain containing 1（Mamld1）遺伝子欠損メスマウスの解析により、機能的黄体退縮を制御する新しい分子機構を解明することである。平成26年度は下記の成果が得られた。Mamld1遺伝子は妊娠後期の野生型マウスにおいて黄体を含む卵巣で発現していた。Mamld1遺伝子欠損妊娠マウスでは分娩開始が遅延することを見出した。野生型マウスでは、妊娠後期の機能的黄体退縮による母体の血中プロゲステロン濃度の低下は、分娩開始のシグナルとして子宮に伝達されることが知られている。妊娠後期の野生型マウスと比較してMamld1遺伝子欠損マウスでは、卵巣のプロゲステロン代謝に関与する20α-Hsd遺伝子の発現量は有意に低下しており、血中のプロゲステロン濃度は高値であった。薬剤投与によるプロゲステロンシグナルの遮断により、Mamld1遺伝子欠損妊娠マウスの分娩は誘導された。Mamld1遺伝子がマウスの分娩開始に関与することが明らかになった。MAMLD1は、妊娠期のマウス卵巣において機能的黄体退縮の調節因子として機能していると推測される。本研究の成果について、科学雑誌に現在投稿中である。
2: おおむね順調に進展している
平成26年度は、Mamld1遺伝子欠損妊娠マウスを用いて解析を行った。解析の結果、妊娠後期のMamld1遺伝子欠損マウスの卵巣において、プロゲステロン代謝に関与する20α-Hsd遺伝子の発現量は有意に低下していることが明らかになった。このことは、MAMLD1がマウス卵巣においてプロゲステロン代謝に関与することを示唆する。現在、本研究成果を科学論文として投稿中である。
これまでの解析から、妊娠後期のMamld1遺伝子欠損マウスの卵巣において、プロゲステロン代謝に関与する20α-Hsd遺伝子の発現量が低下していることを見出した。今後は、培養細胞を用いてMamld1遺伝子の発現抑制および過剰発現を行い、Mamld1遺伝子の発現量の変動により、20α-Hsd遺伝子の発現量が制御されるか否かを確認する。また、20α-Hsd遺伝子のプロモーター領域を用いたレポーターアッセイまたはMAMLD1抗体を用いたクロマチン免疫沈降を行い、20α-Hsd遺伝子の発現をMAMLD1が直接制御しているかを明らかにする。さらに、妊娠後期のMamld1遺伝子欠損マウスおよび野生型マウスの卵巣を用いてマイクロアレイ解析を行い、発現が変動する遺伝子を選定する。その後、リアルタイムRT-PCRを用いて選定した遺伝子の発現定量を行い、MAMLD1の新たな標的遺伝子を同定する。雌性生殖器官である卵巣におけるMAMLD1の機能を明らかにすることを目指す。
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日本生殖内分泌学会雑誌（印刷中）
巻: 20 ページ: 印刷中
Sex Dev. (in press).
巻: 印刷中 ページ: 印刷中
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J Hum Genet.
巻: 60 ページ: 127-131
10.1038/jhg.2014.115
Cytogenet Genome Res.
巻: 144 ページ: 285-289
10.1159/000377649
Sci Rep.
巻: 4 ページ: 5396
10.1038/srep05396
巻: 4 ページ: 4701
10.1038/srep04701
