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2015 年度 実績報告書

軟骨・半月板再生医療の基盤開発を目指した滑膜間葉系幹細胞の局在解析

研究課題

研究課題/領域番号 26893066
研究機関東京医科歯科大学

研究代表者

水野 満  東京医科歯科大学, 再生医療研究センター, 特任研究員 (00733908)

研究期間 (年度) 2014-08-29 – 2016-03-31
キーワード再生医療 / 間葉系幹細胞 / 滑膜幹細胞 / 再生医学 / 関節軟骨 / 半月板 / 局在解析
研究実績の概要

超高齢化社会を迎えた日本において変形性膝関節症に伴う半月板損傷や軟骨変性に対し優れた再生医療技術を開発することは、約850万人と推定される莫大な規模の患者に待望されている。そこで、本研究では滑膜に存在する間葉系幹細胞の局在部位の同定、ならびに純化した細胞の機能解析を行うことによって、特性に基づいた基盤技術の開発を試みた。
滑膜幹細胞の同定を行い、日本再生医療学会で報告した。変形性膝関節症患者由来の滑膜組織を用いて組織学的な解析を行った。滑膜組織は表層(狭義の滑膜)、間質(滑膜下結合組織)、血管周囲の3つに分類できる。これらの固有マーカーを探索するため、細胞膜抗原と細胞外基質に関連する20種の抗体で免疫染色後、各領域に特異的な発現を解析した。さらに、滑膜組織における幹細胞を同定するため酵素処理した滑膜細胞を各マーカーにより分取した後に増殖させ、増殖・軟骨分化能を解析した。免疫染色による解析で、滑膜表層領域、間質、血管周囲のマーカーを同定した。FACSによる分取では、間質領域が90%以上を占めており、最も多く採取できた。軟骨形成能においては、表層領域の滑膜幹細胞が最も小さく1.36±0.26mm、血管領域の滑膜幹細胞が最も大きな軟骨2.04±0.54mmを形成した(n=8, p<0.05)。また、細胞の機能解析により、不安定だが安全性の高いヒト血清を安定的に臨床現場で使用するための幹細胞培養法を開発した。その研究成果を査読有り英文雑誌であるStem cell research and therapy, 6 (1), pp. 1-11に公開した。

現在までの達成度 (段落)

27年度が最終年度であるため、記入しない。

今後の研究の推進方策

27年度が最終年度であるため、記入しない。

  • 研究成果

    (9件)

すべて 2016 2015

すべて 雑誌論文 (5件) (うち国際共著 5件、 査読あり 5件、 オープンアクセス 4件、 謝辞記載あり 1件) 学会発表 (4件) (うち国際学会 2件)

  • [雑誌論文] Cartilage derived from bone marrow mesenchymal stem cells expresses lubricin in vitro and in vivo2016

    • 著者名/発表者名
      Yusuke Nakagawa, Takeshi Muneta, Koji Otabe, Nobutake Ozeki, Mitsuru Mizuno, Mio Udo, Ryusuke Saito, Katsuaki Yanagisawa, Shizuko Ichinose, Hideyuki Koga, Kunikazu Tsuji and Ichiro Sekiya
    • 雑誌名

      PLoS ONE

      巻: 11 ページ: e0148777

    • DOI

      10.1371/journal.pone.0148777

    • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
  • [雑誌論文] Not single but periodic injections of synovial mesenchymal stem cells maintain viable cells in knees and inhibit osteoarthritis progression in rats2016

    • 著者名/発表者名
      Nobutake Ozeki, Ichiro Sekiya; Takeshi Muneta, Hideyuki Koga, Yusuke Nakagawa, Mitsuru Mizuno, Kunikazu Tsuji, Yo Mabuchi, Chihiro Akazawa, Eiji Kobayashi, Kyoko Futamura, Kenji Matsumoto and Tomoyuki Saito
    • 雑誌名

      Osteoarthritis and Cartilage

      巻: in press ページ: in press

    • DOI

      10.1016/j.joca.2015.12.018

    • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
  • [雑誌論文] Transplantation of autologous synovial mesenchymal stem cells promotes meniscus regeneration in aged primates2016

    • 著者名/発表者名
      Shimpei Kondo, Takeshi Muneta, Yusuke Nakagawa, Hideyuki Koga, Toshifumi Watanabe, Kunikazu Tsuji, Shinichi Sotome, Atsushi Okawa, Shinji Kiuchi, Hideo Ono, Mitsuru Mizuno and Ichiro Sekiya
    • 雑誌名

      Journal of Orthopaedic Research

      巻: in press ページ: in press

    • DOI

      10.1002/jor.23211

    • 査読あり / 国際共著
  • [雑誌論文] Platelet-derived growth factor (PDGF)-AA/AB in human serum are potential indicators of the proliferative capacity of human synovial mesenchymal stem cells2015

    • 著者名/発表者名
      Mitsuru Mizuno, Hisako Katano, Koji Otabe, Keiichiro Komori, Yukie Matsumoto, Shizuka Fujii, Nobutake Ozeki, Kunikazu Tsuji, Hideyuki Koga, Takeshi Muneta, Akifumi Matsuyama, Ichiro Sekiya
    • 雑誌名

      Stem Cell Research & Therapy

      巻: 6 ページ: 1-11

    • DOI

      10.1186/s13287-015-0239-2

    • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著 / 謝辞記載あり
  • [雑誌論文] Synovial mesenchymal stem cells promote healing after meniscal repair in microminipigs2015

    • 著者名/発表者名
      Yusuke Nakagawa, Takeshi Muneta, Shimpei Kondo, Mitsuru Mizuno, Kazuo Takakuda, Shizuko Ichinose, Takashi Tabuchi, Hideyuki Koga, Kunikazu Tsuji and Ichiro Sekiya
    • 雑誌名

      Osteoarthritis and Cartilage

      巻: 23 ページ: 1007-1017

    • DOI

      10.1016/j.joca.2015.02.008

    • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
  • [学会発表] PDGF-AA/AB in human serum are potential indicators of the proliferative capacity of human synovial mesenchymal stem cells2016

    • 著者名/発表者名
      Mitsutu Mizuno, Hisako Katano, Koji Otabe, Keiiciro Komori, Yukie Matsumoto, Nobutake Ozeki, Kunikazu Tsuji, Takeshi Muneta, Ichiro Sekiya
    • 学会等名
      Orthopaedic Research Society 2016 Annual Meeting
    • 発表場所
      Orlando, Florida (USA)
    • 年月日
      2016-03-05 – 2016-03-08
    • 国際学会
  • [学会発表] Properties of MSCs derived from Surface, Stroma, and Perivascular synovium of OA patients2016

    • 著者名/発表者名
      Mitsutu Mizuno, Hisako Katano, Yo Mabuchi, Yusuke Ogata, Shizuko Ichinose, Koji Otabe, Keiiciro Komori, Yukie Matsumoto, Nobutake Ozeki, Kunikazu Tsuji, Chiro Akazawa, Takeshi Muneta, Ichiro Sekiya
    • 学会等名
      Orthopaedic Research Society 2016 Annual Meeting
    • 発表場所
      Orlando, Florida (USA)
    • 年月日
      2016-03-05 – 2016-03-08
    • 国際学会
  • [学会発表] 緩徐に凝集させ分離したヒト血清はPDGF-AA濃度が増し滑膜幹細胞の増殖を強める2015

    • 著者名/発表者名
      水野 満、宗田 大、小森 啓一郎、片野 尚子、松本 幸恵、小田邉 浩二、辻 邦和、大川 淳、関矢 一郎
    • 学会等名
      第30回日本整形外科学会基礎学術集会
    • 発表場所
      富山国際会議場ほか(富山市, 富山)
    • 年月日
      2015-10-22 – 2015-10-23
  • [学会発表] 滑膜幹細胞の増殖を促進するヒト血清分離法の工夫2015

    • 著者名/発表者名
      水野 満、小森 啓一郎、片野 尚子、松本 幸恵、小田邉 浩二、 関矢 一郎
    • 学会等名
      第36回日本炎症・再生医学会
    • 発表場所
      虎ノ門ヒルズフォーラム(港区, 東京)
    • 年月日
      2015-07-21 – 2015-07-22

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公開日: 2017-01-06  

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