1986 年度実績報告書

葉緑体DNAの全構造の解析

研究課題

研究課題/領域番号	59065003
研究機関	名古屋大学
研究代表者	杉浦昌弘名大, 国立大学(その他), 教授 (80027044)
研究分担者	小保方潤一北海道大学, 遺伝子実験施設, 助手 (50185667) 篠崎一雄名古屋大学, 遺伝子実験施設, 助教授 (20124216)
キーワード	タバコ / 葉緑体 / DNA / 全塩基配列 / イントロン / トランススプライシング / プロセシング / 光化学系
研究概要	1.昨年度決定したタバコ葉緑体DNAの全塩基配列(155,844塩基対で、今まで決定されたDNA配列のうち最も長い)をもとに、DNAデータベースを使って検索した結果、ヒトミトコンドリアDNAのNADH脱水素酵素のサブユニット遺伝子と相同な配列7個を見出した。この配列はすべて葉緑体内で発現していることをノーザン法で明らかにしたので、遺伝子と同定してndhと命名した。3個ndhはイントロンを持つことも生化学的に証明した。この発見は葉緑体にも呼吸系が存在することを示唆するものである。イネとソラマメとテンサイの葉緑体DNAにもndhが存在することを見出し、ndhが植物葉緑体に普遍的に存在することを示した。 2.昨年度リボソームタンパクS12の遺伝子が3分割されていることを見出したが、それぞれから独立の前駆体RNAが合成され、それらが分子間でスプライシングを受けて1本の成熟mRNAになることをリバーストランスクリション実験で明らかにした。これはin vivoでトランススプライシングを始めて証明したものである。 3.前年に引続き葉緑体in vitro発現系を開発中で、本年はtRNA前駆体から成熟tRNAになるプロセシングの過程を正確に行うin vitroの開発に成功した。さらにこの系の精製を進め、大腸菌のRNasePに相当する酵素標品を得た。 4.パーコールグラジェント法で精製したタバコ葉緑体より光化学系Iを単離し、各々の成分の分画を行い一部のタンパクの構造解析を行ったが、いずれも葉緑体DNAにコードされていないものであった。光化学系【II】の10kdリン酸化タンパクのN-末端アミノ酸がホウレンソウで報告されたので、コンピューター解析の結果葉緑体DNAにコードされていることを発見し、psbHと命名した。卓上超遠心機はDNAの迅速調整に、植物育成チャンバーはタバコ葉の一定条件での生育に大いに役立った。

研究成果

(16件)

すべてその他

すべて文献書誌 (16件)

[文献書誌] 篠崎一雄: Molecular and General Genetics. 202. 1-5 (1986)
[文献書誌] 山田恭司: Plant Molecular Biology. 6. 193-199 (1986)
[文献書誌] 篠崎一雄: Current Genetics. 10. 421-423 (1986)
[文献書誌] 虎沢慶太: Nucleic Acids Research. 14. 3143 (1986)
[文献書誌] 大目優: FEBS Letters. 200. 87-90 (1986)
[文献書誌] 杉浦昌弘: Plant Science. 44. 211-216 (1986)
[文献書誌] 田中実: Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 83. 6030-6034 (1986)
[文献書誌] 篠崎一雄: the EMBO Journal. 5. 2043-2049 (1986)
[文献書誌] 貴島祐治: plant Molecular Biology. 7. 201-205 (1986)
[文献書誌] 若杉達也: Plant Molecular Biology. 7. 385-392 (1986)
[文献書誌] 蒙冰源: plant Sciences. 47. 181-184 (1986)
[文献書誌] 篠崎一雄: Plant Molecular Biology Reporter. 4. 110-147 (1986)
[文献書誌] 篠崎一雄: the Japanese Journal of Genetics. 61. 371-409 (1986)
[文献書誌] 在田典弘: FEBS Letter. 210. 153-156 (1987)
[文献書誌] 篠崎和子: FEBS Letter. (1987)
[文献書誌] 篠崎一雄,小谷編: "Advances in Biophysics(1章Organization of Chloroplast Genomes)" Japan Scientific Societies Press Elsevier, 296 (1986)

1986 年度 実績報告書

葉緑体DNAの全構造の解析

研究代表者

杉浦 昌弘 名大, 国立大学(その他), 教授 (80027044)

研究成果

[文献書誌] 篠崎一雄: Molecular and General Genetics. 202. 1-5 (1986)

[文献書誌] 山田恭司: Plant Molecular Biology. 6. 193-199 (1986)

[文献書誌] 篠崎一雄: Current Genetics. 10. 421-423 (1986)

[文献書誌] 虎沢慶太: Nucleic Acids Research. 14. 3143 (1986)

[文献書誌] 大目優: FEBS Letters. 200. 87-90 (1986)

[文献書誌] 杉浦昌弘: Plant Science. 44. 211-216 (1986)

[文献書誌] 田中実: Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 83. 6030-6034 (1986)

[文献書誌] 篠崎一雄: the EMBO Journal. 5. 2043-2049 (1986)

[文献書誌] 貴島祐治: plant Molecular Biology. 7. 201-205 (1986)

[文献書誌] 若杉達也: Plant Molecular Biology. 7. 385-392 (1986)

[文献書誌] 蒙冰源: plant Sciences. 47. 181-184 (1986)

[文献書誌] 篠崎一雄: Plant Molecular Biology Reporter. 4. 110-147 (1986)

[文献書誌] 篠崎一雄: the Japanese Journal of Genetics. 61. 371-409 (1986)

[文献書誌] 在田典弘: FEBS Letter. 210. 153-156 (1987)

[文献書誌] 篠崎和子: FEBS Letter. (1987)

[文献書誌] 篠崎一雄,小谷編: "Advances in Biophysics(1章Organization of Chloroplast Genomes)" Japan Scientific Societies Press Elsevier, 296 (1986)

1986 年度実績報告書

杉浦昌弘名大, 国立大学(その他), 教授 (80027044)