研究概要 |
昨年度までの研究によって、バッタにAdipokinetic hormone(AKH)を注射すると、リポホリンに多量のジグリセリドが積みこまれ、同時に血液中にフリーの状態で存在しているapo-【III】(分子量2万)がリポホリンに結合すること(リポホリン1分子に9分子のapo-【III】が結合する)を明らかにした。そして、さらにapo-【III】精製が達成され、その方法が確立した。そこで、本年度は、精製されたリポホリン、精製されたapo-【III】、AKH、と体外にとり出したバッタの脂肪体とを試験管で反応させ、生体内で観察された上記のAKHの、effectをin vitroで再現させ、AKHの作用機構の解明へ一歩前進を試みた。しかしながら、in vivoで発現したAKHの作用をin vitroで再現することは、予期に反して、はなはだ困難で、期待した結果はなかなか得られなかった。たとえば、リポホリン,apo【III】,AKH,脂肪体をインキュベートした後、密度勾配遠心法で調べても、リポホリンの密度はあまり変化せず、またapo-【III】のリポホリンへの結合も判然としなかった。幾多の失敗の後、インキュベーションのシステムに過剰の酸素を送ることを考え、これをテストした結果、in vivoでのAKHの作用ほど顕著ではないが、明らかにAKHの作用を確認することができた。すなわち、リポホリンの密度は低下し、ジグリセリドの量は増加し、apo-【III】の結合が見られた。しかも、このAKHの作用にはCaイオンが必須であることも示すことができた。今後は、この系に改良を加え、in vitroのシステムを確立する。 なお、本年度は、以上の研究の他、リポホリンの採血時における凝集、リポホリンの糖鎖構造の解析、apo-【III】の生合成なども研究した。特に、apo-【III】の生合成の開始は、バッタの長距飛行の開始と一致することを明らかにした。
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