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1989 年度 研究成果報告書概要

電子顕微鏡による遺伝子の構造と機能の解析

研究課題

研究課題/領域番号 61440011
研究種目

一般研究(A)

配分区分補助金
研究分野 植物保護
研究機関北海道大学

研究代表者

四方 英四郎  北海道大学, 農学部, 教授 (00001389)

研究分担者 佐野 輝男  北海道大学, 農学部, 助手 (30142699)
上田 一郎  北海道大学, 農学部, 助教授 (10113523)
飯塚 敏彦  北海道大学, 農学部, 教授 (50001441)
生越 明  北海道大学, 農学部, 教授 (80109503)
木下 俊郎  北海道大学, 農学部, 教授 (10001421)
研究期間 (年度) 1986 – 1989
キーワード電子顕微鏡 / 核酸 / 遺伝子
研究概要

1)チトクロ-ムC展開法によって二本鎖DNA、二本鎖RNAおよび環状一本鎖RNAの観察法を確立した。展開した核酸は白金-パラジウムで回転蒸着して観察した。またBAC展開法による核酸の電顕観察法も確立できた。本法ではウラニル酢酸で染色し、チトクロ-ムC展開法より簡便に核酸が観察出来た。(上田・佐野)
2)イネ萎縮ウイルス、イネ黒条萎縮ウイルス、イネラギッドスタントウイルスの全ての分節ゲノム二本鎖RNAを電顕観察してその大きさを決定した。測定値は塩基配列より得られる値とよく一致した。(上田)
3)植物病原菌Rhizoctonia属の核外遺伝子と思われる二本鎖RNAを電顕観察したところ線状の遺伝子が観察された。(生越)
4)ホップわい化ウイロイド、スモモのウイロイドは、やく50nmの棒状粒子として観察されるが、90%ホルムアミド、60Cの変性条件下で展開すると90〜100nmの一本鎖状分子として観察された。(佐野)
5)テンサイのミトコンドリヤDNAを電顕観察すると0.28〜51μmの環状分子が観察された。正常と雄性不稔株の間では、0.28-0.6μmの分子間で大きさに差が認められた。葉緑体DNAを電顕観察すると約45umの環状分子として観察され、分子量は約101×10^6と測定された。(木下)
6)昆虫病原細菌の結晶性毒素生産遺伝子をコ-ドするプラスミドを、Bacillus thuringensisより抽出し、電顕観察したところ70kbの環状DNAが認められた。(飯塚)
7)イネ萎縮ウイルス感染細胞よりバイロプラズムを抽出した。植物磨砕液を分画遠心して超薄切片法で電顕観察すると5,000g分画にバイロプラズム様構造物が同定された。(上田)

  • 研究成果

    (8件)

すべて その他

すべて 文献書誌 (8件)

  • [文献書誌] I.Uyeda et al.: "Size of dsRNA genome segments of rice dwarf and rice ragged stunt Viruses determined by electron microscopy" J.Electron Microsc.30. 34-58 (1990)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
  • [文献書誌] T.Iizuka et al.: "Electron microscopic observation of the plasmid DNA bearing insecticidal crystal protein gene in Bacillus thuringiensis" The J.of Sericultural Science of Japan. 48. 448-456 (1989)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
  • [文献書誌] Y.Kijima et al.: "Restriction fragment map of sugar beet(Beta vulgris L.)Chloroplast DNA" Plant Molecular Biology. 7. 201-205 (1986)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
  • [文献書誌] T.Mikami: "Heterogeneity of circular mitochondrial DNA molecules from sugar beet with normal and male sterile cytoplasms." Curr.Genet.10. 695-700 (1986)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
  • [文献書誌] Y. Kishima, T. Mikami, T. Harada, K. Shinozaki, M. Sugiura, and T. Kinoshita.: "Restriction fragment map of sugar beet (Beta vulgaris L.) chloroplast DNA." Plant Molecular Biology. 7. 201-205 (1986)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
  • [文献書誌] T. Mikami, T. Harada, and T. Kinoshita.: "Heterogeneity of circular mitochondrial DNA molecules from sugar beet with normal and male sterile cytoplasms." Curr. Genet., 10 695-700, 1986.

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
  • [文献書誌] T. Iizuka, M. Arakida, H. Kikuta, K. Isida, I. Uyeda, and E. Shikata.: "Electron microscopic observation of the plasmid DNA bearing insecticidal crystal protein gene in Bacillus thuringiensis." The J. of Sericultural Science of Japan, 58 448-456, 1989.

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
  • [文献書誌] I. Uyeda, S. Y. Lee, G. W. Leng, G. M. Ao, Z. P. Deng, X. S. Liang, K. Ohshima, and E. Shikata.: "Size of dsRNA genome segments of rice dwarf and rice ragged stunt viruses determined by electron microscopy." J. Electron microsc., 39 34-58, 1990.

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より

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公開日: 1993-03-26  

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