細胞間情報伝達の遺伝子機構と免疫ネットワーク・システムの形成に関する研究

1987 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 61440036
• 研究機関: 千葉大学
• 研究代表者: 谷口 克 千葉大学, 医学部, 教授 (80110310)
• 研究分担者: 徳久 剛史 神戸大学, 医学部, 教授 (20134364)
• キーワード: 抑制T細胞レセプター / V_α遺伝子ゲノム塩基配列 / Antiーsense RNA

研究概要

免疫抑制系の初期相には抗原を認識するT細胞とそれに相補的な構造をとるT細胞が存在する. 特に後者はいわゆる外来抗原の内部イメージを表現することから抑制T細胞系のレパトアの成り立ちと抗原レセプターの研究に重要な材料を提供する. 本研究ではKLH特異的抑制T細胞(KLHーTs)ハイブリドーマからV_α鎖をクローン化し塩基配列を調べたところ, これまで報告のないユニークなV_α遺伝子では殆んどすべてのKLHーTsで使用されていることが, ノザン, サザン解析から明らかとなった. 一方これらハイブリドーマから再構成を起こしたゲノムV遺伝子を単離し, その塩基配列をgerm lineのものと比較したところ, 検索した3つの細胞株ですべて同一の塩基配列であり, しかもグナニン一個の添加によって構成されるN領域を除くとgerm line由来のものであった. このことは, 多価抗原刺激でも抑制T細胞はクローン性の増殖を示すことが判明した. 次にこのV_α遺伝子の機能をトランスジェニックマウスにおいて調べる目的で, 2つの組み換え遺伝子を用意した. すなわち, 一つはV_α遺伝子プロモーターに遺伝子再構成したゲノム由来のL,V,J遺伝子に定常部領域のcDNAあるいはゲノム由来定常部遺伝子を結合したもの, もう一つは, V_α遺伝子プロモーターにIg遺伝子エンハンサーおよびLVJCcDNAを結合したものを作成した. これらの遺伝子をα鎖欠損Junkat細胞に遺伝子導入し, どのV_α遺伝子組換え体が有効に発現するか調べている. 一方生体内における遺伝子発現調節系を確立するために, ヒト・メタロチオネインプロモーターに接続した1ーAβ鎖遺伝子のAntiーsense遺伝子を作成in vitro培養細胞系(M12B細胞)に導入しその活性を調べた. その結果, Ia抗原の発現を特異的に抑制できた. このことは, 人為的に特定の遺伝子機能発現調節する系の確立に成功したと言って良い.

研究成果

• [文献書誌] Shigemto, K.; Knno, M.; Sakamoto, T,; Imai, K.; Taniguchi, M.: Microbiol. Immunol.31. 899-909 (1987)
• [文献書誌] Ono, K.; Kato, F.; Taniguchi, M.: J. Mol. Cell. Immunol.3. 167-175 (1987)
• [文献書誌] Takahashi, K.; Ono, K.; Hirabayashi, y.; Taniguchi, M.: J. Immunol.IN PRESS.
• [文献書誌] Koseki, A.; Imai, K.; Taniguchi, M.: Pro. Natl. Acad. Sci. USA. SUBMITTED.
• [文献書誌] Matsushita, E.; Sumida, T.; Tagawa, M.; Taniguchi, M.: J. Immunol.SUBMITTED.
• [文献書誌] Taniguchi, M. ed by J. J. Marchalonis.: "Genetic association of the suppressor factor taht regulate immune response. In T cell receptor and factors. Vol. II" CRC Press,12 (1987)
• [文献書誌] Taniguchi,M.; Matsushita,E.; Imai,K.; Koseki, A.; sumida, T.; Takemori, T.; Ito, T.; Yamamoto, S.; Kanno, M. ed by Wedd, D.; Pierce, C.; Cohen, S.: "Suppressor T cell receptor and functional molecule. In the 5th International Lymphokine workshop." The Humana Press Inc., 8 (1987)