新しい腫瘍マ-カ-の開発と臨床診断への応用ーー複合糖質の変化を中心として

1989 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 61440086
• 研究機関: 名古屋大学
• 研究代表者: 竹内 純 名古屋大学, 医学部, 教授 (60064789)
• 研究分担者: 長坂 徹郎 名古屋大学, 医学部, 医員 ; 川島 康平 名古屋大学, 医学部, 助手 (70161312) ; 中島 伸夫 名古屋大学, 医学部, 助教授 (80023810)
• キーワード: Monoclonal antibody / Large proteoglycan / Small proteoglycan / Chondroitin 6ーsulfate / Chondroitin 4ーsulfate / Immunohistochemisty / Rhabdomyosarcoma / Malignant tumor

研究概要

昭和63年度、平成元年度に,ヒトYolk sac tumorより分離精製したlarge prteoglycan(以下large PGと略す)に対して作製したモノクロ-ナル抗体のうち、抗体2B1は抗原(large PG)と特異的に反応し、免疫組織化学的にもヒト胎児組織の間質、および腫瘍間質に強陽性を示すことが明らかとなった。今年度はさらにこの抗体2B1の特性について、免疫組織化学的に検索し、次の成績を得た。
1.抗体2B1の抗原として用いたlarge PGを分離精製した卵黄嚢腫(original tumor)について、抗原の分布局在を詳細に観察した。抗体2B1陽性所見はmyxoid patternを示す部位の細胞間マトリックスおよび血管周囲、嚢胞周囲にみられた。また細胞内外にみられるhyaline globuleは特に強い陽性成績を示した。既存の卵巣組織および成熟奇形腫成分では陰性で、さきに作製した抗体6B6(small PGと特異的に反応する抗体)による陽性成績とは対照的であった。抗体2B1陽性のhyaline globule形成は卵黄嚢腫に特有な像であり、肝より発生した卵黄嚢腫の細胞内外にみられたglobuleを2B1で染色することにより診断を容易にすることができた。
2.非上皮性腫瘍の細胞間マトリックスを詳細に観察した。横紋筋肉腫のマトリックスは抗体2B1陽性のlarge PGによって占められており、その糖鎖としてはコンドロイチン6ー硫酸が豊富であった。平滑筋肉腫、悪性線維性組織球腫その他の非上皮性腫瘍ではsmall PGおよびコンドロイチン4ー硫酸も併せ認められることと対照的であった。そしてコンドロイチン6ー硫酸を糖側鎖とするlarge PG過剰産生あるいはその集積が横紋筋肉腫のmyxoid patternの出現の要因であると考えられた。抗体2B1染色とコンドロイチン6ー硫酸の証明(市販の抗体3B3:Couchman et al.1984.による染色)と併せ行うことは横紋筋肉腫の確定診断を行うために大変有用であると思われる。

研究成果

• [文献書誌] Sobue M.: "Production and immunohistochemical characterization of a monoclonal antibody raised against to proteoglycan" Histochemical Journal. 21. 455-459 (1989)
• [文献書誌] Sobue M.: "Establishment of a cell line producing basement membrane components from an adenoid cystic carcinoma of the salivary gland" Vichows Archiv B. 57. 203-208 (1989)
• [文献書誌] Sobue M.: "Immunohistochemical techniques for detection of dermatan sulfate proteoglycan in tissue sections" Stain Technology. 64. 43-47 (1989)
• [文献書誌] Fukata S.: "Immunohistochemical localization of proteoglycans in interstitial elements of human pancreas and biliary system" Histochemical Journal. 21. 707-714 (1989)
• [文献書誌] Nagasaka T.: "Effects of beta-D-xylosides on proliferation and matrix formation of adherent fibroblastic cells in mouse bone marrow culture" Experimental Hematology. 17. 923-928 (1989)
• [文献書誌] Nakashima N.: "Immunohistochemical characterization of extracellular matrix components of yolk sac tumors" Virchows Archiv B. 58. (1990)
• [文献書誌] Ohiwa N.: "Immunohistochemical characterization of extracellular matrix components of rhabdomyosarcoma tissues" Virchows Archiv A.
• [文献書誌] Nara Y.: "Immunohistochemical characterization of extracellular matrix components of salivary gland tumors"
• [文献書誌] Lai S.: "Chondroitin sulfate content in human serum"
• [文献書誌] 中島伸夫,竹内純: "癌組織由来プロテオグリカンに対するモノクロ-ナル抗体の作製と応用 新生化学実験講座(山川民夫他編)第3巻" 東京化学同人, (1990)
• [文献書誌] 長坂徹郎,竹内純: "血液 新生化学実験講座(山川民夫他編)第3巻" 東京化学同人, (1990)
• [文献書誌] 竹内純: "基質反応.炎症性反応.現代病理学大系(飯島宗一他編)第5巻" 中山書店(東京),
• [文献書誌] 長坂徹郎,竹内純: "グリコサミノグリカン 広範囲血液・尿化学検査.免疫化学的検査(日本臨床増刊号)" 日本臨床社, (1990)