ポリオウイルス遺伝情報と神経毒性発現

1986 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 61480151
• 研究機関: 東京大学
• 研究代表者: 野本 明男 東大, 医学部, 助教授 (70112670)
• キーワード: 1型ポリオウイルス / 遺伝情報発現 / 神経毒性 / 感染性cDNAクローン / 5'noncoding領域 / RNAの機能構造 / 人工変異株ウイルス

研究概要

1型ポリオウイルスの神経毒性発現がどのゲノム領域により影響を受けているのかを知るために、1型ポリオウイルスの強毒Mahoney株と弱毒Sabin1株ゲノムから作製した感染性cDNAクローンの各ゲノム領域に相当する制限酵素断片を入れかえ、動物細胞にトランスフェクトすることにより、両ウイルス株間の組換え体ウイルスを多数作製した。これらウイルス株についてサル神経毒性試験を行った結果、神経毒性発現に関するゲノム領域は複数存在し、特に5'noncoding領域(742塩基)中に神経毒性を強く支配する領域があることが明らかとなった。このことは1型ポリオウイルスの神経毒性発現は、ウイルスの複製効率と密接に関係していることを示唆している。
そこでSabin1株ゲノムの5'noncoding領域の塩基配列をMahoney株の相当する塩基配列で置きかえることにより、神経毒性を担う塩基の同定を行った。その結果、5'末端から480番目の塩基がA(Sabin1株ではG)であることがMahoney株ゲノムの5'noncoding部位が担う神経毒性発現にとって必要であることが明らかとなった。しかしながら、その逆にMahoney株塩基配列のうちこのAをGに変化させただけではSabin1株の5'noncoding部位が担う弱毒性発現を説明するには不十分であった。
以上の結果は、ポリオウイルス弱毒化には5'noncodingのRNAの各領域間の相互作用が重要に関係していることを示すものである。そこでSabin1株の感染性cDNAクローンを利用し、多くの人工変異を5'noncoding領域に導入し複製効率の低下したウイルス株を作製し、それからの復帰変異株のゲノム構造の解析を行うことで5'noncoding部位内の相互作用を持つ領域をさがしている。現在のところ、5'末端から200番目前後の塩基と500番目前後の塩基間に相互作用があるらしいとの結果を得ている。

研究成果

• [文献書誌] Toshiko Omata: Journal of Virology. 58. 348-358 (1986)
• [文献書誌] Shusuke Kuge: Journal of Molecular Biology. 192. 473-487 (1986)
• [文献書誌] Yoshihiro Okada: Virology. 156. (1987)
• [文献書誌] Narushi Iizuka: Virology. 156. (1987)
• [文献書誌] Shusuke Kuge: Journal of Virology. (1987)
• [文献書誌] Noriyuki Kawamura: 現在不明.
• [文献書誌] Akio Nomoto: "Positive Strand RNA Viruses" Alan R.Liss,Inc., (1987)
• [文献書誌] Akio Nomoto: "Molecular Basis of Virus Disease SGM40" Cambridge University Press., (1987)