| 研究課題/領域番号 |
61480468
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| 研究機関 | 自治医科大学 |
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研究代表者 |
曽根 〓史 自治医科大学, 医学部, 助教授 (20049034)
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| 研究分担者 |
石塚 盛雄 中央大学, 理学部, 助教授 (50168241)
香川 靖雄 自治医科大学, 医学部, 教授 (30048962)
西郷 敏 自治医科大学, 医学部, 助教授 (70049071)
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| キーワード | 好熱性細菌 / 耐熱性酵素 / シトクロム酸化酵素 / プロトンポンプ / 遺伝子構造 |
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| 研究概要 |
1.好熱菌PS3のチトクロム酸化酵素のサブユニットIIIをコードする遺伝子(CO3)はサブユニットIIやIをコードする遺伝子の下流に存在することが明らかになった。さらに下流には未同定のオープンリーディングフレームがあり、これは蛋白質サブユニット(IV)としても蛋白質の側からも確認された。前年までの結果と合わせて、好熱菌のチトクロム酸化酵素は4つのサブユニットからなり、それらをコードする遺伝子はクラスターとして1つのオペロンを作っていることが明らかになった。
2.前述のサブユニットIVの確認はSDS電気泳動によって行った。良い結晶を得るためにミクロヘテロジェニティをSDS電気泳動で調べると、どの標品にも分子量一万のペプチドが含まれている。このペプチドのN末端付近の配列は塩基配列を翻訳したものと一致した。また抗牛サブユニットIVとも反応した。
3.ゲル濾過溶出液をレザー光散乱計、示差屈折計と分光光度計(280nm)で測定し、PS3チトクロム酸化酵素が非イオン性界面活性剤溶液中でモノマーとして存在することを示した。X線小角散乱も同様の結果を示した。
4.部分的熱変性してH^+ポンプ能の失くなった標品のESRの結果、この標品のCuAに帰因するESRパターンが変化していることが判明した。
5.細菌の呼吸鎖複合体について綜合的考察を行い英文レヴューを著した。
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