| 研究分担者 |
本堂 敏信 日本分光(株), 生化学応用技術課, 技術員
遠藤 俊吉 日本医科大学, 医学部, 教授 (80147743)
山本 保博 日本医科大学, 医学部, 助教授 (70125079)
林田 眞喜子 日本医科大学, 医学部, 助手 (60164977)
仁平 信 日本医科大学, 医学部, 講師 (40089636)
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| 研究概要 |
多波長マルチチャンネル検出器付 HPLC(MULTI-HPLC)による緊急薬毒物分析のシステムソフト化のための基礎研究を行い、以下の結果を得た。
[方法]1)主要中毒原因物質48種類の標準薬物の原末を【CH_3】CNに溶解した。2)MULTI-HPLCシステム。PUMP(800-PU),injector(860-CO),system controller(801-SC),検出器はMULTI-320,データの測定及び処理はPC-9801VM2,DP-L320/98(ver.1.31),で行った。3)HPLC分離条件。移動相は10mMHC1【O_4】+10mMNaC1【O_4】70%,【CH_3】CN30%,カラム温度は50℃,流速1.0ml/min.,測定感度は0.04ABS/FS,カラムはFinepak Sil C18S,4mm i.d.×25cm。4)標準薬物のLibraryの作成。各薬物単独のmax.chromatogramをとり、各peak topにおけるスペクトルの登録を行った。
[結果〕1)上記条件による薬物の相対保持時間並びにスペクトル情報を右図に示した。作成したLibraryを用いて、全種類混合薬物標準液のmax.chromatogramのpeakの同定を試みた。peakが不分離であっても、単一のスペクトルが得られるものは、r=0.98-0.99と高い相関でpeakの同定が可能であった。多成分からなるpeakについてはpeak deconvolution(P-D)によってそれぞれがcomponentとして分離され、同定が可能であった。2)CH3CN除蛋白による生体成分(プール血清,尿)で、薬物類似のスペクトルを持つものはなかった。3)P-Dを行ったもののうち、81%は原点を通る検量線が得られ、定量性も良好であった。4)検出限界は10-50ngで、100ngでも多成分peakのP-Dは可能であった。以上により、MULTI-HPLCシステムは多剤併用の多い急性中毒原因物質同定に関し、極めて有用であり、更に実用化推進中である。
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