1990 年度実績報告書

遺伝子発現におけるRNAスプライシングの分子生物学的研究

研究課題

研究課題/領域番号	62065009
研究機関	京都大学
研究代表者	志村令郎京都大学, 理学部, 教授 (60025426)
研究分担者	坂本博京都大学, 理学部, 助手 (00187048) 岡田清孝岡崎国立共同研究機構基礎生物学研究所, 助教授 (50101093) 安田国雄京都大学, 理学部, 助教授 (30025473)
キーワード	mRNA前駆体 / スプライシング / キャップ構造 / U6snRNA / オルタナティブスプライシング / 免疫グロブリンμ鎖遺伝子 / ショウジョウバエ / 性決定遺伝子
研究概要	mRNA前駆体のスプライシングにおいては、多数の因子が前駆体上に集合してスプライスソ-ムと呼ばれる複合体を形成し、この複合体のなかで反応が進行する。我々が以前に報告していたmRNA前駆体の5'末端のキャップ構造のスプライシング促進効界が、このスプライスソ-ム形成を促進することによるものであることを明らかにした。さらに、この効果を担う因子である核内キャップ構造結合タンパク質を精製し、部分的ではあるがそのアミノ酸配列を決定した。また、スプライシング反応を触媒する因子の実体であることが提唱されているU6snRNAが、反応進行中にスプライス部位近傍に存在していることをUVクロスリンク法を用いて世界に先駆けて発見した。多イントロン前駆体のスプライシング反応機構の研究に関しては、主に二つの系で行った。第1の系である免疫グロブリンμ鎖遺伝子におけるオルタナティブスプライシングの制御に関しては、膜結合型のmRNA産生に必須であるエキソンC4とエキソンM1の間のスプライシング反応が、最も下流に位置する膜結合型エキソンM1とM2の間のスプライシング反応に依存することを発見した。このことは多イントロン前駆体のスプライシング反応におけるエキソン認識機構の解明につながるものと考えられる。第2の系であるショウジョウバエの性決定遺伝子群の発現制御に関しては、遺伝学的に最も上位に位置するSexーlethal遺伝子産物が、transformer遺伝子のmRNA前駆体の性に非特異的なアクセプタ-部位に結合しその使用を抑制することによって、雌特異的スプライシングを誘導すること、またtransformerおよびtransformerー2遺伝子産物が協同的に働いて、さらに下位のdoublesex遺伝子のmRNA前駆体の雌特異的なスプライシングを誘導することを明らかにした。

研究成果
(6件)

すべてその他

すべて文献書誌 (6件)

[文献書誌] Hideaki Shiraishi: "Random introduction of localized single nucleotide substitutions into cloned DNA." DNA AND PROTEIN ENGINEERING TECHNIQUES Newsletter. 2. 43-45 (1990)
[文献書誌] Yoshiro Shimura: "Genetics of tRNA processing in <E.coli>___ー." in Methods in Enzymology (eds.Abelson,J.& Dahlberg,J.) Academic Press,New York/London. 181B. 395-400 (1990)
[文献書誌] Mutsuhito Ohno: "Nuclear cap binding protein from HeLa cells." in Methods in Enzymology (eds.Abelson,J.& Dahlberg,J.) Academic Press,New York/London. 181B. 209-215 (1990)
[文献書誌] Kunio Inoue: "Binding of the <Drosophila>___ー <Sexーlethal>___ー gene product to the alternative splice site of <transformer>___ー primary transcript." Nature. 344. 461-463 (1990)
[文献書誌] Kiyotaka Okada: "Rversible rootーtip rotation in <Arabidopsis>___ー <thaliana>___ー seedlings induced by obstacleーtouching stimulus." Science. 250. 274-276 (1990)
[文献書誌] Mutsuhito Ohno: "A nuclear cap binding protein from HeLa cells." Nucleic Acids Research. 18. 6989-6995 (1990)

1990 年度実績報告書

遺伝子発現におけるRNAスプライシングの分子生物学的研究

研究代表者

志村令郎京都大学, 理学部, 教授 (60025426)

研究成果

[文献書誌] Hideaki Shiraishi: "Random introduction of localized single nucleotide substitutions into cloned DNA." DNA AND PROTEIN ENGINEERING TECHNIQUES Newsletter. 2. 43-45 (1990)

[文献書誌] Yoshiro Shimura: "Genetics of tRNA processing in <E.coli>___ー." in Methods in Enzymology (eds.Abelson,J.& Dahlberg,J.) Academic Press,New York/London. 181B. 395-400 (1990)

[文献書誌] Mutsuhito Ohno: "Nuclear cap binding protein from HeLa cells." in Methods in Enzymology (eds.Abelson,J.& Dahlberg,J.) Academic Press,New York/London. 181B. 209-215 (1990)

[文献書誌] Kunio Inoue: "Binding of the <Drosophila>_ー <Sexーlethal>_ー gene product to the alternative splice site of <transformer>___ー primary transcript." Nature. 344. 461-463 (1990)

[文献書誌] Kiyotaka Okada: "Rversible rootーtip rotation in <Arabidopsis>_ー <thaliana>_ー seedlings induced by obstacleーtouching stimulus." Science. 250. 274-276 (1990)

[文献書誌] Mutsuhito Ohno: "A nuclear cap binding protein from HeLa cells." Nucleic Acids Research. 18. 6989-6995 (1990)

1990 年度 実績報告書

遺伝子発現におけるRNAスプライシングの分子生物学的研究

研究代表者

志村 令郎 京都大学, 理学部, 教授 (60025426)

研究成果

[文献書誌] Hideaki Shiraishi: "Random introduction of localized single nucleotide substitutions into cloned DNA." DNA AND PROTEIN ENGINEERING TECHNIQUES Newsletter. 2. 43-45 (1990)

[文献書誌] Yoshiro Shimura: "Genetics of tRNA processing in <E.coli>___ー." in Methods in Enzymology (eds.Abelson,J.& Dahlberg,J.) Academic Press,New York/London. 181B. 395-400 (1990)

[文献書誌] Mutsuhito Ohno: "Nuclear cap binding protein from HeLa cells." in Methods in Enzymology (eds.Abelson,J.& Dahlberg,J.) Academic Press,New York/London. 181B. 209-215 (1990)

[文献書誌] Kunio Inoue: "Binding of the <Drosophila>___ー <Sexーlethal>___ー gene product to the alternative splice site of <transformer>___ー primary transcript." Nature. 344. 461-463 (1990)

[文献書誌] Kiyotaka Okada: "Rversible rootーtip rotation in <Arabidopsis>___ー <thaliana>___ー seedlings induced by obstacleーtouching stimulus." Science. 250. 274-276 (1990)

[文献書誌] Mutsuhito Ohno: "A nuclear cap binding protein from HeLa cells." Nucleic Acids Research. 18. 6989-6995 (1990)

1990 年度実績報告書

志村令郎京都大学, 理学部, 教授 (60025426)

[文献書誌] Kunio Inoue: "Binding of the <Drosophila>_ー <Sexーlethal>_ー gene product to the alternative splice site of <transformer>___ー primary transcript." Nature. 344. 461-463 (1990)

[文献書誌] Kiyotaka Okada: "Rversible rootーtip rotation in <Arabidopsis>_ー <thaliana>_ー seedlings induced by obstacleーtouching stimulus." Science. 250. 274-276 (1990)