1989 年度実績報告書

発現ベクタ-を利用した分子育種モデルに関する研究

研究課題

研究課題/領域番号	62440008
研究機関	名古屋大学
研究代表者	平井篤志名古屋大学, 農学部, 助教授 (60023470)
研究分担者	山形秀夫名古屋大学, 農学部, 助教授 (20023468) 服部一三名古屋大学, 農学部, 助手 (40023494) 蓬原雄三名古屋大学, 農学部, 教授 (70023405)
キーワード	イネ / 細胞質ゲノム / 葉緑体DNA / ミトコンドリアDNA / 分子育種 / クロ-ニング / 物理地図
研究概要	1.イネ属植物の内B、C、Eなどのゲノムを持つ野生イネは遺伝資源として大切であるので、それらの葉緑体DNAの構造解析とクロ-ニングを行った。これらの植物の葉緑体DNAを制限酵素BamHIで切断し、アガロ-ス電気泳動で分析したところ、Aゲノムである栽培種を入れた4種でパタ-ンはすべて異なっていた。これを用いてλファ-ジへの葉緑体DNA断片のクロ-ニングを行った。そのラムダDNAライブラリ-から葉緑体のpetDなど各種遺伝子とハイブリダイズするクロ-ンを選抜し、Eゲノムを持つOryza australiensisとBゲノムを持つO__ー.punctataの環状DNAの物理地図を作製した。またCゲノムを持つO__ー.officinalisでもほぼ完成している。これらを総合すると、お互いの違いは塩基の置換で、挿入・欠失が有っても100塩基程度であった。 2.栽培種イネ「日本晴」の緑葉からミトコンドリアDNAを抽出し、λファ-ジにクロ-ニングした。これらのクロ-ンから他の植物の既知ミトコンドリア遺伝子をプロ-ブにミトコンドリアクロ-ンを選抜し、"genome walking"を行い、イネミトコンドリアDNAの完全な物理地図とクロ-ンバンクを作製した。このDNAは約500kbのマスタ-サ-クルから複製されることが予想され、数カ所で組み替えを起こしており複雑な構造をとっていることが明らかになった。またイネにおいてもミトコンドリアDNAに多数の葉緑体DNAの断片が挿入されていることが明らかになった。これが高等植物のミトコンドリアDNAのサイズが大きいことの原因の一つと思われるが、これがどのような機能を持つかは明かではない。

研究成果
(7件)

すべてその他

すべて文献書誌 (7件)

[文献書誌] Hiratsuka,J.: "The complete sequence of the rice(Oryza sativa)chloroplast genome." Mol.Gen.Genet.217. 185-194 (1989)
[文献書誌] Nishizawa,Y.: "The nucleotide sequences and expression of genes for the beta and epsilon subunits of ATp synthase from rice(Oryza sativa L.)." Jpn.J.Genet.64. 223-229 (1989)
[文献書誌] Shimada,H.: "A physical map and clone bank of the rice chloroplast genome." Plant Mol.Biol.Report.7. 284-291 (1989)
[文献書誌] Abe,T.: "Selection of higher regenerative callus and change in isozyme pattern in rice(Oryza sativa L.)" Theor.Appl.Genet.78. 648-652 (1989)
[文献書誌] Yamagata,H.: "Use of Bacillus brevis for efficient synthesis and secretion of human epidermal growth factor." Proc.Natl.Acad.Sci.USA. 86. 3589-3593 (1989)
[文献書誌] Hattori,K.: "Genetic studies on chloroplast proteins in rice.I.Simple analytical procedure for the analysis of chlorophyll proetin complex." Japan.J.Breed.
[文献書誌] Hirai,A.: "BIOTECHNOLOGY IN AGRICULTURE AND FORESTRY,Vol.14 Molecular Structure of Chloroplast DNA from Rice" SpringerーVerlag,

1989 年度 実績報告書

発現ベクタ-を利用した分子育種モデルに関する研究

研究代表者

平井 篤志 名古屋大学, 農学部, 助教授 (60023470)

研究成果

[文献書誌] Hiratsuka,J.: "The complete sequence of the rice(Oryza sativa)chloroplast genome." Mol.Gen.Genet.217. 185-194 (1989)

[文献書誌] Nishizawa,Y.: "The nucleotide sequences and expression of genes for the beta and epsilon subunits of ATp synthase from rice(Oryza sativa L.)." Jpn.J.Genet.64. 223-229 (1989)

[文献書誌] Shimada,H.: "A physical map and clone bank of the rice chloroplast genome." Plant Mol.Biol.Report.7. 284-291 (1989)

[文献書誌] Abe,T.: "Selection of higher regenerative callus and change in isozyme pattern in rice(Oryza sativa L.)" Theor.Appl.Genet.78. 648-652 (1989)

[文献書誌] Yamagata,H.: "Use of Bacillus brevis for efficient synthesis and secretion of human epidermal growth factor." Proc.Natl.Acad.Sci.USA. 86. 3589-3593 (1989)

[文献書誌] Hattori,K.: "Genetic studies on chloroplast proteins in rice.I.Simple analytical procedure for the analysis of chlorophyll proetin complex." Japan.J.Breed.

[文献書誌] Hirai,A.: "BIOTECHNOLOGY IN AGRICULTURE AND FORESTRY,Vol.14 Molecular Structure of Chloroplast DNA from Rice" SpringerーVerlag,

1989 年度実績報告書

平井篤志名古屋大学, 農学部, 助教授 (60023470)