| 研究課題/領域番号 |
62440014
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| 研究機関 | 山口大学 |
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研究代表者 |
飴山 實 山口大学, 農学部, 教授 (90022053)
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| 研究分担者 |
滝本 晃一 山口大学, 農学部, 助教授 (00115875)
中島 弘二 聖路加看護大学, 教授 (80034940)
品川 恵美子 山口大学, 農学部, 助手 (20116726)
松下 一信 山口大学, 農学部, 助手 (50107736)
足立 収生 山口大学, 農学部, 助教授 (20027189)
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| キーワード | 酢酸菌 / PQQ / アルコール脱水素酵素 / グルコース脱水素酵素 / チトクロムO / チトクロムa |
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| 研究概要 |
1、酢酸菌の糖質酸化系呼吸鎖に関して:(1)酢酸菌Gluconobacter属の呼吸鎖はチトクム0関与と、チトクロムC関与の二つの末端に分枝していることを既に明らかにしている。今回、アルコール脱水素酵素(ADH)を欠いた一群が同時にチトクロムCとシアン耐性を欠いていることを明らかにし、G.nonacetigenusと命名した。また、この菌の細胞膜にADHを再構成することでエタノール酸化系呼吸鎖が発現することも明らかにした。(2)酢酸菌Acetobacter属の呼吸鎖はチトクロムOとチトクロムaが末端に存在し、それらはGluconobacter属と異なり培養PHでは変動しないが、振とう培養か静置培養かで大きく変動することを明らかにした。
2、酢酸菌に含まれるPQQ酵素の機能に関して:(1)Gluconobacter属菌のADHは、培地中のPHが低下してゆくにともなってPQQを欠いたアポ型に成ることを示すとともに、実際に細胞膜を低いPHの緩衝液とインキュベートすることでADHがアポ化することも明らかにした。(2)Gluconobacter属菌のグルコース脱水素酵素(GDH)は再構成実験よりリン脂質中でユビキノンQ_<10>と直接電子を伝達していることを証明した。
3、PQQによる酢酸菌の生育促進に関して:PQQはAcetobacter属菌の生育を促進することが既に知られているが、今回そのPQQが種々のアミノ酸と容易にシック塩を介する付加体を形成することを明らかにした。この付加体はアポGDHを活性化することはできないが、PQQ以上の酢酸菌に対する生育促進活性を有することが示された。
4、PQQ酵素によるセンサーの開発に関して:PQQ酵素は高速の電子伝達反応を触媒し、かつ電極と直接反応できることが示されてきている。今回、ADHを含む酢酸菌細胞膜を電極に固定化することによって有効なアルコールセンサーを開発した。
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