| 研究概要 |
非ケト-シス型高グリシン血症は生後まもなくより重篤な中枢神経症状で発症し、乳児早期に死亡するか幸い死を免れても高度の脳障害を残す遺伝性代謝疾患である。欧米ではフェニルケトン尿症に匹敵する頻度の神経難病として注目されている。本症の代識障害はグリシン開裂酵素の欠損であることが1969年吾々により初めて証明された。グリシン開裂酵素は4つの蛋白から構成される複合酵素である。すなわち、ピリドキリル燐酸を含むP蛋白、リポ酸を含むH蛋白、テトラヒドロ葉酸を必要とするT蛋白、lioamide、dehydrogenase(L蛋白)から構成される。前年度までの研究に於いて吾々は本症の多数例について検索した結果、大部分の例特に重症型はP蛋白の欠損に基づくことを明らかにした。
本年度は本症の大部分を占めるPー蛋白欠損症の遺伝子レベルの異常を明らかにする目的で、P蛋白をコ-ドするcDNAのクロ-ニングに取組んだ。先づ鶏肝から精製結晶化したP蛋白を家兎に免疫して抗P蛋白抗体を作製し、之を用いて鶏肝のcDNAライブラリ-をスクリ-ニングしPー蛋白をコ-ドするcDNAを単離した。次にこの鶏cDNAと抗P蛋白抗体をプロ-ブとしてヒト肝cDNAライブラリ-をスクリ-ニングし、ヒトPー蛋白をコ-ドするcDNAをクロ-ニングしその構造を決定した。ヒトP蛋白cDNAの全長は3,783bpで1,020個のアミノ酸をコ-ドしていた。推定分子量は112,869で予めimmunoblottingにより推定された値と一致した。このヒトP蛋白cDNAを用い本症の肝組織(剖檢剤)の遺伝子解析をSouthern blot法により行なった結果、1例にPー蛋白遺伝子の部分欠損が認められた。他の7例ではSouthern blot法で検出可能な異常は見出し得ず、これらの例は恐らく点変異に基づくものと推測され、今後詳細な遺伝子の構造解析を行なう予定である。
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