ヒトの遺伝子マップと染色体のDNAセグメントマップの作成

1989 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 62440083
• 研究機関: 慶応義塾大学
• 研究代表者: 清水 信義 慶應義塾大学, 医学部, 教授 (50162706)
• 研究分担者: 工藤 純 慶應義塾大学, 医学部, 助手 (80178003)
• キーワード: 染色体ソ-ティング / 雑種細胞 / Adenine nucleotide translocater / 遺伝子マッピング / カルパイン / ATP synthase βサブユニット / プロテインキナ-ゼC / Phosphoribosylpyrophosphate synthetase

研究概要

ポリアミン・ジギトニン処理法でヒト培養リンパ球(GM130B)から得た分裂中期染色体をヘキスト33258またはヨウ化プロピジウムで染色し、FACS 440セルソ-タ-を用いて18画分に分別できるようになった。分別されてセルソ-タ-から滴下してくる各染色体画分を直接ニトロセルロ-スフィルタ-にスポット状に集め、ラベルしたDNAプロ-ブとのハイブリダイゼ-ションを迅速に行うスポット・ブロット・ハイブリダイゼ-ション法を確立した。このようにソ-ティングした染色体フィルタ-と雑種細胞パネルのDNAを併用して13種のヒト遺伝子をマップした。すなわちPhosphoribosylpyro-phosphate synthetase(PRPS)の2個のサブユニット遺伝子PRPS1/Xq21-qter、PRPS2/Xpter-q21、およびPRPS1の2個の相同遺伝子PRPS1L1/7p22-qter、PRPS1L2/第9染色体、さらに、Adenine nucleotide translocater(ANT)/第4染色体、Ca^<2+>依存性のプロテア-ゼ(カルパイン)の4個のサブユニット遺伝子CANPL1/第11染色体、CANPL2/第1染色体、CANPL3/第15染色体、CANPS/第19染色体、またプロテインキナ-ゼCの基質となる80K蛋白の遺伝子80K-H/第19染色体、ATP synthase βサブユニット(ATPSB)の遺伝子/12p13ーqter、ATPSBの2個の相同遺伝子ATPSBL1/第2染色体、ATPSBL2/第17染色体である。

研究成果

• [文献書誌] Minoshima,S.: "Isolation of Giant Fragments from Flow-Sorted Human Chromosomes." Cytometry. 11. (1990)
• [文献書誌] Neckelmann,N.: "The Human ATP Synthetase β Subunit Gene:Sequence Analysis,Chromosome Assignment and Differential Expression." Genomics. 5. 829-843 (1989)
• [文献書誌] Li,K.: "The Human Muscle Adenine Nucleotide Translocator Gene has Four Exons,is Located on Chromosome 4 and is Developmentally Regulated." J.Biol.Chem.264. 13998-14004 (1989)
• [文献書誌] Sakai,K.: "Isolation of cDNAs Encoding a Substrate for Protein Kinase C:Nucleotide Sequence and Chromosomal Mapping of the Gene for a Human 80Κ Protein." Genomics. 5. 309-315 (1989)
• [文献書誌] Taira,M.: "Localization of the Human Phosphoribosylpyrophosphate Synthetase Subunits I and II Genes(PRPS1 and PRPS2)to Different Regions of the X Chromosome and Assignment of Two PRPS1-Related Genes to Autosomes 7 and 9." Somat.Cell Mol.Genet.15. 29-37 (1989)