| 研究課題/領域番号 |
62480192
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| 研究機関 | 千葉大学 |
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研究代表者 |
小俣 政男 千葉大学, 医学部, 講師 (90125914)
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| 研究分担者 |
細田 和彦 千葉大学, 医学部, 医員
伊藤 よしみ 千葉大学, 医学部, 助手 (70159929)
横須賀 収 千葉大学, 医学部, 助手 (90182691)
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| キーワード | HEPADNA / DHBV / ウイルス発癌 / 化学発癌 / PCR |
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| 研究概要 |
昭和63年度は既に発生した肝癌の癌部、非癌部からDNAを抽出しクローニングの手法により癌部から3個、非癌部から1個の組みこまれたDHBV DNAクローンを得てその構造解析を行った。まず、癌部から得られたクローンは以下の特徴を有していた。a)DHBV DNAのDRという部分から組みこまれている頻度が高かった。b)組み込まれたDNAは欠損、再編成が著しく、特にc-geneの欠損が著しかった。c)組みこまれた周辺の細胞DNAも再編成をきたしていた。これらの特徴はヒトHBVで見られた肝癌DNA中の組み込まれたDNAの構造と同様でありDHBVがヒト発癌のモデルとなりうる事が更に明確となった。非癌部からのウイルスDNAの構造解析も行った。癌部と異なり、得られたクローンには欠損、再編成はなく極めてDHBV DNA本来の形態をとどめていた。癌部、非癌部の間には組み込まれたDHBV DNAの形態に差異がある事が明かとなった。。
又本年度はRAS発癌遺伝子のPOINT MUTATION検索の為の基本的技術を確立した。すなわち、polymerase chain reaction (PCR)を用いて、RAS発癌遺伝のコドン、12、13、61のすべてを直接塩基配列を決定しうる方法を確立した。
現在この方法を用いて化学発癌剤、ウイルス発癌による肝癌中のpoint mutationを検索中である。
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